BRADFORD蛋白质定量试剂服务介绍 武汉友名生物公司
1.与传统的蛋白表达系统相比,省略了耗时耗力的质粒转化、细胞培养、收集、破碎和离心等, -地提高了工作效率;
2. 反应体系小,能同时平行合成多种不同的蛋白质;
3. 反应周期短,能满足高通量配体筛选和蛋白质组学的科研要求;
4. 开放的反应体系,便于改变各项反应条件,有利于调控基因的转录,蛋白质的合成和翻译后修饰,避免包涵体的形成;
5. 稳定的反应体系,可以偶联其它工艺,形成自动化、程序化、规模化生产,加快重组蛋白的纯化、功能表征和后续的结构解析;
6. 无细胞结构-,可用于生产对宿主有毒1害作用的外源蛋白,避免蛋白表达对宿主细胞的致死作用;
7. 添加非天然-酸或同位素标记-酸,表达特殊蛋白。
8.对于多次跨膜或由于疏水性强导致的普通细胞系表达困难的项目有--。
蛋白质分子伴侣molecular chaperones)是蛋白质合成过程中形成空间结构的控制因子,广泛存在于从-到人的细胞中。分子伴侣新生肽链的折、加工租穿膜进大细胞器的转位过程中起关键作用。它们有些结合在多肽链上防止肽链降解或其侧链非特异-;有些则可引导某些肽链正确折叠并集合多条肽链成为较大的结构。
分子伴侣结合并稳定其靶蛋白质的能力具有特-,并依赖于atp水解。例如热激蛋白heat shock protein)就是分子伴侣的一个家族。因加热时可在许多细胞中被-出来而得名。热激蛋白源于细胞内源性保护蛋白质。另外,分子伴侣还可以是-、磷脂、核糖体及一些小分子物质。
蛋白表达科学研究
rbpi56或其功能性-端片段通常在真核细胞中表达,将有助于获得具有生物学活性抗g菌重组蛋白。但因该种表达方式存在成本高、表达量低等问题而影响其实际应用。用原核细胞表达bpi23-fcγ1重组蛋白 。
profinity exact融合标签表达系统:利用bio-rad rofinity exact 系统制备无标签、n 端无任何其它残基 的重组蛋白只需大约1 小时。该亲和介质较为稳定,可多次用于目的蛋白的纯化,从而节约了 成本。适用于纯化以不溶的-体形式存在的重组蛋白。profinity exact 融合标签系统的有效性和一致性将使其成为获得高产率无标签重组蛋白的通用平台。
微量凯氏kjeldahl定氮法
样品与浓1-共热。含氮有机物即分解产生氨-,氨又与-作用,变成-氨。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例,其反应式如下:
nh2 ch2 cooh+3h2 so4 ――2co2 +3so2 +4h2o+nh3 (1)
2nh3 +h2 so4 ――(nh4 )2 so4 (2)
(nh4 )2 so4 +2naoh――2h2 o+na2 so4 +2nh3 (3)
反应1、(2)在凯氏瓶内完成,反应3在凯氏蒸馏装置中进行。为了加速-,可以加入cuso4作催化剂,k2so4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液,滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。计算所得结果为样品总氮量,如欲求得样品中蛋白含量,应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量,即用样品中蛋白氮乘以6.25即得。
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