酵母DNA提取-「在线咨询」

如何评价和选择支原体检测试剂盒

1. 灵敏度。

灵敏度常用支原体基因组的拷贝数或支原体菌株的cfu表示。

2. 特---和广谱性。

---的试剂盒应检测的支原体物种越多越多，并且特---强，即只针对支原体，不针对其他---等微生物，没有交叉反应。

3. 稳定性。

---比液体试剂的稳定性高。

4. 样本类型及样本处理。

一款好的试剂盒，会标出它适合的样本类型，也会说明如何处理样本。要注意有的样本含有抑制pcr反应的物质，因此需要处理。

5. 对照品。

一个好的试剂盒，会带有阳性对照和内控对照。内控对照是用于监测pcr是否正常。如果样本含有抑制pcr的物质，则内控对照的条带会发生缺失。有---支原体污染的样本由于样本中的支原体对内控对照产生了竞争性抑制，因此支原体条带越强，内控条带越弱

酵母基因组dna提取好方法

dna提取主要是ctab方法，其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫cn酸胍法、碱裂解法。生物方式：酶法。根据---分离纯化方式的不同有；硅质材料、阴离子交换树脂等。

提取基因组dna和细胞核dna是不同的方法

提取细胞核要先把细胞破碎分离出细胞核,要在甘油或其他保护剂中进行

sds十二烷---酸钠：可破坏细胞膜、核膜,并使组织蛋白与dna分离

catb是一种抽提液,破坏细胞膜的~

dna不溶于---1醇,---1醇可以析出dna,产生白色絮状沉淀,用枪头挑出就可以了

dna提取过程中各种试剂的作用及原理

溶液ii-naoh-sds液：naoh：---在ph大于5，小于9的溶液中，是稳定的。但当ph>;12或ph<3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。 在溶液ii中的naoh浓度为0.2mo1/l，加抽提液时，该系统的ph就---12.6， 因而促使染色体dna与质粒dna的变性。

　　sds：

　　sds是离子型表面活性剂。它主要功能有：

　　(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。

　　(2)解聚细胞中的---白。

　　(3)sds能与蛋白质结合成为r-o-so3-…r+-蛋白质的复合物，使蛋白---性而沉淀下来。 但是sds能抑制核糖---酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中 (用rnase去除rna时)受到干扰。

溶液iii--3mol/l naac(ph4.8)溶液：

　　naac的水溶液呈碱性，为了调节ph至4.8，必须加入大量的冰---。 所以该溶液实际上是naac-hac的缓冲液。用ph4.8的naac溶液是为了把ph12.6的抽提液，调回ph至中性， 使变性的质粒dna能够复性，并能稳定存在。而高盐的3mol/l naac有利于变性的大分子染色体dna、 rna以及sds-蛋白复合物凝聚而沉淀之。前者是因为中和---上的电荷，减少相斥力而互相聚合.