山东赭曲霉亲和柱厂家常用解决方案「中检维康」

亲和柱原理介绍

亲和层析iac可称为色谱技术，是一种利用抗原特---可逆结合特性的spe技术,根据抗原的高选择性,从复杂的待测样品中提取目标化合物。主要原理是将抗、惰性微珠共价结合，然后装入小柱，将被测溶液流过亲和柱，而非目标化合物则沿柱流下，然后用洗脱缓冲液洗脱抗原被测物，从而得到纯化的抗原被测物，收集的抗原样品液可直接用于 hplc 分析或处理后用荧光光度计检测。

亲和柱适用注意事项

(1) ------对人体有害，应戴手套操作。凡接触到标样的玻璃器皿都要用5%次酸钠浸泡过夜。

(2) 不要使用过有效期的亲和柱。

(3) 亲和柱应在2~8℃保存。不要冷冻。

(4) 使用前，亲和柱需至少提前半小时回温至室温(25℃左右)。

(5) hplc液相测定值、试剂盒计算值接近zui高检出值时，样本的实际含量可能大于柱容量而造成流穿，建议减少上样体积重新过柱。

(6) 称取的样品量以及提取液的体积可根据实际情况按比例调整，建议不少于10g样。

亲和柱亲和层析的基本原理

亲和层析是一种吸附层析，抗原或和相应的或抗原发生特---结合，而这种结合在一定的条件下又是可逆的。

所以将抗原或固相化后，就可以使存在液相中的相应或抗原选择性地结合在固相载体上，借以与液相中的其他蛋白质分开，达到分离提纯的目的。此法具有有效、快速、简便等优点。

亲和柱——亲和层析的分离原理

生物体中许多大分子化合物具有与其结构相对应的专一分子可逆结合的特性，如抗原与抗体，酶与底物或抑制，与受体等，这种结合往往是专一的而且是可逆的，生物分子间的这种结合力称为亲和力，亲和层析的分离原理简单地说就是通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性的基质也称载体上，利用分子间亲和力的特---和可逆性，对另一个分子进行分离纯化。被固定在基质上的分子称为配体，配体与基质共价结合，构成亲和层析的固定相，称为亲和吸附剂，蛋白质的生物特---可以帮助选择特---的配体，一般是目的蛋白质与配体结合而不吸附杂质。蛋白质吸附后再利用洗脱液的快速变换和加入竞争剂的方法进行洗脱。