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聚合酶链式反应pcr是一种用于放大扩增特定的dna部分片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊dna copy，pcr的zui大特点是能将微量的dna大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的---，还是几十年前凶1---中凶1手所---的毛发、皮肤或---，只要能分离出一丁点的dna，就能用pcr加以放大，进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。由1983年美国mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易dna扩增法，意味着pcr技术的真正诞生。到如今2013年，pcr已发展到第三代技术。1976年，中国科学家钱嘉韵，发现了稳定的taq dna聚合酶，为pcr技术发展也做出了基础性贡献。

反向pcr( inverse pcr, ipcr术

原理:反向pcr是克1隆已知序列旁侧序列的一种方法，主要原理是用一种在已知序列中无切点的---性内切酶---基因组dna.后酶切片段自身环化.以环化的dna作为模板，用一对与已知序列两端特---结合的引物，扩增夹在中间的未知序列。该扩增产物是线性的dna的部分片段，大小取决于.上述---性内切酶在已知基闲侧翼dna序列内部的酶切位点分布情况。用不同的---性内切酶---，可以得到大小不同的模板dna，再通过反向pcr获得未知片段。

该方法的不足是:需要从许多酶中选择---酶，或者说必须选择一种合适的酶进行酶切才能得到合理大小的dna部分片段。这种选择不能在非酶切位点切断靶dna。大多数有核基因组含有大量中度和高度重复序列，而在yac或cosmid中的未知功能序列中有时也会有这些序列，这样，通过反向pcr得到的探针就有可能与多个基因序列杂交。

突变：pcr克1隆的一大优点是能够通过克1隆将所需突变引入目的基因中，以便进行突变研究。在 定1点突变中，经过设计的pcr引物可将碱基置换、删除或插入整合到特定序列中。引物定位到已克1隆至质粒中的序列上。随后，含有引入突变的pcr产物通过自我连接，重新生成环状质粒，并用于转化感受态细胞。

测序：pcr是为测序富集模板dna的一种相对简单的方法。为---dna序列准确性，---建议使用高保真pcr来制备测序模板。在 sanger测序中，pcr扩增片段经纯化并用于测序反应。使用常用的测序引物结合位点对pcr引物的 5′末端进行标记，以简化测序工作流程。

         二代测序 ngs中，pcr被广泛用于构建dna测序-。在ngs-制备中，dna样品通过pcr反应富集在起始量有限的情况下并使用adaptor以及用于多重检测的index标记。除了具有高保真度，dna聚合酶还应具有zui小的扩增偏好性，从而使测序-具有高覆盖度。

pcr技术不仅可用于基础研究，还适用于日常的---诊断、---学调查和农业生物技术研究。这些应用要求---的性能、及时的灵敏度和严格的标准。因此，所使用的pcr仪和pcr试剂必须符合这些要求和目的。

分子诊断应用包括---、---突变检测以及感1染性---检测。在---学中，利用 pcr进行人类身份鉴定是通过对---的短串联重复序列str进行扩增而区分个体的。在农业学中，pcr在食物病原体检测、育种植物基因分型和 gmo测试中具有重要作用。