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elisa试剂盒的成分

1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子igg,亲合纯化 96t

2 酶标记: (30倍浓缩)hrp标记抗小鼠白介素-6兔子igg,亲合纯化 0.4ml x 1

3 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5ml x 2

4 缓冲液: 含1% bsa, 0.05%吐温20 bps 30ml x 1

5 标记稀释液: 含1% bsa, 0.05%吐温20 bps 12ml x 1

6 显色剂: tmb底物液 15ml x 1

7 终止液: 1n--- 12ml x 1

8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% bsa, 0.05%吐温20 bps 50ml x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) (450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°c) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°c ± 1°c) 洗瓶 (用于洗板) ---试剂管(用于浓缩酶标记和显色剂)

elisa试剂盒——会出现的问题及解决办法

1. 加入反应终止液后，没有吸光值或吸光值偏低。

a.原因：未加入酶标记物。

解决办法：请按照操作步骤进行。

b.原因：试剂盒内容物未能充分回。

解决办法：确定试剂盒内容物回温后再进行操作。

c.原因：室温太低。

解决办法：若室温太低(<19℃)，请于操作步骤4，适当延长温育时间。

d.原因：未使用试剂盒的清洗液清洗。

解决办法： 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。

e.原因：试剂盒已过有效期限。

解决办法：请更换成仍在有效期限内的试剂盒。

elisa试剂盒——elisa实验常见问题及解决方案

背景深，全部呈有色通常的elisa背景值od<0.2 

1  洗涤不充分，洗后未拍干，样品中其它成分残留或酶标记物残留 洗液准确配制；充分洗涤，静置15秒，---拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用，不要反复使用，否则易造成污染。

2  底物污染，未避光保存，出现颜色 弃去底物，重新配置

3  样品稀释液污染 弃去稀释液，重新配置

4  吸头重复使用，未洗净或消毒不--- 吸头尽可能---使用

5  不正确的孵育时间，温度尤其是底物孵育的时间 常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。完全按照说明书要求。

6  偶联抗体streptavidin-hrp浓度过高 按照说明书调整到合适的浓度

7  elisa板子不正确的贮存 酶标板贮存于2-8 ℃；使用结合力低点的elisa板

8  没有正确封闭 在标准品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间

9  样本溶血--- 建议使用非溶血或轻微溶血样本，---溶血样本会导致背景偏高。