-液相色谱方法「-通恒」

hplc对流动相的一般要求

流动相就比如人体的---，其直接影响到整个系统的正常运行与否。

© 应该使用hplc级的溶剂，不能互相混溶的溶剂不可以直接切换！

© 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的很低波长,低于该波长后,溶剂会有很强的紫外吸收，从而影响---的稳定性、干扰对所分析物质的检测。

© hplc所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。建议每天更换新鲜的水。长期不用时，必须把使用水的管路用有机的溶剂置换，防止长霉。

© 仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。

© 当有流路堵塞时，可以尝试将之反接后冲洗。污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影响泵和系统的的性能。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(ph 4 至7) 中尤其如此。

---液相色谱的系统组成

hplc 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。此外，还可根据需要配置梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代hplc 仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型hplc 仪还备有自动馏分收集装置。

---液相色谱

hplc是在---的液相色谱法基础上发展起来的，其以液体作为流动相，并采用颗粒极细的---固定相的柱色谱分离技术。其分离机制与常规柱色谱相同，但填料精细，需高压泵推动，柱效高，分析速度快。与气相色谱不同的是液相色谱中流动相亦参与组分的分离过程，其组成、比例和ph值可灵活调节，分离模式多样。在实际操作中主要通过改变流动相的组成来调节样品在色谱柱的保留值和选择性，从而使不同样品得到分离。