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染色体原位杂交电话「多图」

发布者:武汉思特进科技发展有限公司  时间:2022-3-23 






原位杂交是指将特定标记的已知顺序-为探针与细胞或组织切片中-进行杂交,从而对特定-顺序进行精0准确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。

原位杂交in situ hybridization将标记的-探针与细胞或组织中的-进行杂交,称为原位杂交。

使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。



在选择探针类型的同时,还需要选择标记方法。探针的标记方法很多,选择什么标记方法主要视个人的习惯和可利用条件而定。但在选择标记方法时,还应考虑实验的要求,如灵敏度和显示方法等。一般认为放0射性探针比非放0射性探针的灵敏度高。放0射性探针的实际灵敏度不依赖于所采用的标记方法,如随机引物延伸法往往得到比缺口平移法更高的比活性 。在检测单拷贝基因序列时,应选用标记效0率0高、显示灵敏的探针标记方法。在对灵敏要求不高时,可采用保存时间长的生物素探针技术和比较稳定的碱性磷酸酶显示系统。



在选用探针时经常会受到可利用探针种类的---。如在建立dna-时,手头没有筛选特定基因的克0隆探针,这时就可用寡核苷酸探针来代替。但必须首先纯化该基因的编码蛋白,并测定6个以上的末端---酸序列,通过反推的核苷酸序列合成一套寡核苷酸探针。如果已有其它动物的同种基因克0隆,因为人类和动物间在同一基因的核苷酸顺序上存在较高的同源性,因此可利用已鉴定的动物基因作探针来筛选人类基因克0隆。对于基因核苷酸序列背景清楚而无法获得克0隆探针时,可采用pcr方法扩增某段基因序列,并克0隆人合适的质粒载体中,即可得到自己的探针。这种方法十分简便,无论基因组dna探针还是cdna探针都可以容易地获得,而且,可以建立pcr的---方法,与探针杂交方法可作对比,可谓一举两得。




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