河北酶联ELISA试剂盒价格多重优惠 北京中检维康公司
将目标包被于微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的结合,然后加入微生物化的目标,将未结合的生物素洗净后,加入hrp标记和亲和素,再次---洗涤后加入tmb底物显色。tmb在---化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。在450nm波长下测定吸光度o.d.值,计算样品浓度。
1 试剂盒未充分平衡 试剂盒从2~8℃冰箱取出后打开盒盖,于室温平衡至少20分钟,---所有试剂已平衡至室温约25℃
2 样品不适合做elisa检测 样品一般选择培养上清、血浆。其他样品形式可能不适合做elisa检测或者需要优化检测的条件例如稀释液的成分
3 酶标板在贮存或洗后拍干时过分干燥 防止板过于干燥
4 包被遭到破坏 操作温和,移液枪不能碰到孔底
5 样本和孵育条件不合适 按照说明书条件,建议孵育过程中全程振荡孵育。
6 洗涤浸泡时间过长 按照说明书操作。勿人为增加浸泡时间;
7 偶联hrp试剂污染 弃去试剂,重新配置
8 错误的稀释偶联hrp试剂 弃去试剂,重新配置
9 tmb底物孵育时间过短,因非人为因素影响,需要优化孵育时间 确定合适的孵育时间:人为判定-高浓度的标准品出现深蓝色;s4-5有淡蓝色;机器判定620 nm波长下测定od值达到0.6-0.65
10 样本浓度过高或存在基质效应 建议做不同稀释倍数,确认样本稀释倍数。
11 滤光片设置有问题或者波长选择不对 确认仪器设置及选择正确的波长检测。
12 酶标板不适合做elisa 不能使用细胞培养板,建议使用elisa高吸附力板子。
酶联吸附试验enzymelinkedimmunosorbentassay,elisa指将可溶性的抗原或结合到聚乙烯等固相载体上,利用抗原结合专一性进行反应的定性和定量检测方法。它是应用比较多的一种酶技术。elisa试剂盒elisakits已成为---和植物病理学研究中的常用诊断工具,是检测组织提取液和细胞培养液中目标/抗原的理想工具,也是重要的控制手段。
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