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结 果

一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较

对两组试验动物在完成了基础免0疫后，尾静脉采集少量---，分离血0清，进行间接elisa测定抗0体效价，检测结果见图1。由图中数据可知，新的改良免0疫方法，在第二次免0疫后，抗0体效价即达到1：104。两组数据经生物学统计软件spss(windows 13．0版)进行t检验，统计结果差异极---(p(0．001)。

二、两种免0疫方式小鼠融合率比较

在细胞融合后约7～10 d可见孔内杂交瘤细胞生长，当细胞融合成片达孔底面积的35％～50％时，用elisa检测特---抗0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短，但获得的抗0体效价更高。

由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数，所以改良法抗原用量明显少于常规法，从而---减少了实验成本的消耗。

此外，本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及抗0体阳性率，发现改良免0疫法均---高于常规免0疫法。

经过后续实验，证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后，抗0体阳性率可达检测孔的90％以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养，并冻存复苏后仍具有分泌afp—mcab的能力，并经染色体计数结果表明已成功获得一株afp—mcab细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。

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通过皮下或肌肉单点注射免0疫动物，小鼠每针次100μl，家兔每针次200μl。

1佐剂与抗原混合后应尽快注射，若放置时间较长出现水油相分层，则必须按上述步骤2重新振荡混匀；

2抽入针管前应摇匀，抽入针管后应尽快注射；

3尽量选择---淋巴0结附近如腋窝和腹0股0沟附近的皮下或肌肉进行免0疫。