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hplc对流动相的一般要求

流动相就比如人体的---，其直接影响到整个系统的正常运行与否。

© 应该使用hplc级的溶剂，不能互相混溶的溶剂不可以直接切换！

© 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的很低波长,低于该波长后,溶剂会有很强的紫外吸收，从而影响---的稳定性、干扰对所分析物质的检测。

© hplc所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。建议每天更换新鲜的水。长期不用时，必须把使用水的管路用有机的溶剂置换，防止长霉。

© 仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。

© 当有流路堵塞时，可以尝试将之反接后冲洗。污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影响泵和系统的的性能。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(ph 4 至7) 中尤其如此。

hplc概述

液相色谱系统由泵及流路系统、进样系统、色谱柱系统以及检测器系统构成，其中进样系统可细分为手动进样与自动进样，两种进样方式均要求进样的准确性与精密度。其中手动进样系统由于人为因素对进样的准确性有很多大的影响，如人员的手动进样熟练程度等，渐渐退出市场。而自动进样系统，由于具有---的准确度以及精密度，几乎排除人员因素的影响以及具有高通量、自动运行序列等特点而成为hplc系统的标配。

液相色谱进样系统位于泵后，色谱柱之前的高压区域，如下图所示。流动相混合之后流经进样系统，将样品溶液带入到色谱柱内，完成进样。

液相色谱柱的结构：

1液相色谱柱由柱管、压帽、卡套密封环、筛板滤片、接头、螺丝封头与柱填料等组成。

柱管：多用不锈钢制成，若果使用时柱压不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有---的光洁度。用于柱填料的装填。空柱各组件均为不锈钢材质，---受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。压帽：即色谱柱两端套合于柱管端外壁的塑性圆柱帽，中部有小孔，多为聚四氟乙烯制成，用于固定筛板。

密封环：位于接头螺旋环内壁的弹性环，多为聚四氟乙烯制成，用于色谱柱两端压帽与柱外壁的密封。

2柱填料：

液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。

正相柱：

多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3-10 μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合-cn，-nh2等---团即所谓的键合相硅胶。

反相柱：

主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基---团(ods)的非极性填料。也有无定型和球型之分。

常用的其他的反相填料还有键合c8、c4、c2、---等，其颗粒粒径在3-10μm之间。