表面微生物限度检查方法来电洽谈 世纪久海检测技术公司

---效力

试验所用的菌株传代次数不得超过 5 代从jun种保藏中心获得的冷冻干燥jun种为第 0 代，并采用适宜的jun种保藏技术进行保存，以---试验菌株的生物学特性。培养基适用性检查的jun种及新鲜菌体培养见表 1。

表 1培养基适用性检查、方法适用性试验、---效力测定用的试验菌培养条件

试验菌株                   试验培养基                         培养温度             培养时间

1、金黄色putao球菌

胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基

30～35℃

18～24小时

2、铜绿假单胞菌

3、大肠埃希菌

胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大

豆胨液体培养基

4、白色nian珠菌

沙氏---琼脂培养基或沙氏葡

萄糖液体培养基

20～25℃

24-48小时

5、黑曲霉

20～25℃5～7天或直到获得丰富的孢子

微生物限度检查

1.平皿法

   平皿法包括倾注法和涂布法。除另有规定外，取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和菌数测定，每稀释级每种培养基至少制备2个平板。

   培养和计数 除另有规定外，胰酪大豆胨琼脂培养基平板在30～35℃培养3～5天，沙氏---琼脂培养基平板在20～25℃培养5～7天，观察菌落生长情况，点计平板上生长的所有菌落数，计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。2、---细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落(colony)。若同稀释级两个平板的菌落数平均值不小于15，则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。

   菌数报告规则 需氧菌总数测定宜选取平均菌落数小于300cfu的稀释级、霉菌和酵母菌总数测定宜选取平均菌落数小于100cfu的稀释级，作为菌数报告的依据。取zui高的平均菌落数，计算1g、1ml或10c㎡供试品中所含的微生物数，取两位有效数字报告。食品微生物与人类关系紧密，对食品微生物的了解、利用、和---在很早以前就有很大的进展了。

   如各稀释级的平板均无菌落生长，或仅zui低稀释级的平板有菌落生长，但平均菌落数小于1 时，以<1 乘以zui低稀释倍数的值报告菌数。

培养基适用性检查

微生物计数用的商品化的预制培养基、由脱水培养基或按配制的培养基均应进行培养基适用性检查。

学习：类似于无菌检查法，此处将“成品培养基”修改为“商品化的预制培养基”，表述，下文还有，不再赘述。

计数方法适用性试验

供试液制备

根据供试品的理化特性与生物学特性，采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时，应均匀加热，且温度不应超过45°c。供试液从制备至加人检验用培养基，不得超过1小时。

学习：此处应注意同时进行数个品种计数方法适用性试验时的时效问题。“供试液制备”这一节，水溶性供试品、水不溶性非油脂供试品、油脂类供试品的制备方法无变化。在2020版药典中，将原“(4)需用特殊方法制备供试液的供试品”中的小类四种提升至与上述3类并列表述，除气雾剂供试品外，制备方法无变化。将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。具体是膜剂供试品、肠溶及结肠溶制剂供试品、气雾剂供试品2015版：气雾剂、---供试品、贴剂、贴膏剂供试品2015版：贴膏剂供试品。

供试品中微生物的回收

……涂布法“取15~20ml”修订为“取适量通常为15~20ml”。……(2)薄膜过滤法薄膜过滤法所采用的滤膜孔径应不大于0.45jltm，直径一般为50mm,若采用其他直径的滤膜，冲洗量应进行相应的调整。供试品及其溶剂应不影响滤膜材质对微生物的截留。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。如海产品以副溶血性弧菌作为参考菌群，蛋与蛋制品以沙门氏菌菌、金黄色葡萄qiu菌、变形gan菌等作为参考菌群，米、面类食品以蜡样芽孢gan菌、变形gan菌、霉菌等作为参考菌群，罐头食品以耐热性芽孢菌作为参考菌群等。使用时，应---滤膜在过滤前后的完整性。

学习：这个“完整性”应该类似生产过程所用的滤膜的完整性，不同的是“---”的方法是滤器验收、厂家报告单、使用中外观检查等；---时应该进行适当方式的完整性检测。