唐山布鲁克拉曼光谱原理承诺守信 泰科施普公司

拉曼光谱在生物学研究中的应用    

拉曼光谱是研究生物大分子的有力手段，由于水的拉曼光谱很弱、谱图又很简单，故拉曼光谱可以在接近自然状态、活性状态下来研究生物大分子的结构及其变化。

生物大分子的拉曼光谱可以同时得到许多-的信息：

1蛋白质二级结构：α-螺旋、β-折叠、无规卷曲及β-回转

2蛋白质主链构像：---ⅰ、ⅲ，c-c、c-n伸缩振动

3蛋白质侧链构像：---氨酸、酪氨酸、色氨酸的侧链和后二者的构像及存在形式随其微环境的变化

4对构像变化敏感的羧基、巯基、s-s、c-s构像变化

5生物膜的脂肪酸碳氢链旋转异构现象。

6dna分子结构以及和dna与其他分子间的作用。

7研究脂类和生物膜的相互作用、结构、组分等。

8对生物膜中蛋白质与脂质相互作用提供重要信息。

拉曼光谱仪

1、拉曼光谱用于分析的优点　　拉曼光谱的分析方法不需要对样品进行前处理，也没有样品的制备过程，避免了一些误差的产生，并且在分析过程中操作简便，测定时间短，灵敏度---优点

2、拉曼光谱用于分析的不足　　(1)拉曼散射面积

(2)不同振动峰重叠和拉曼散射强度容易受光学系统参数等因素的影响

(3)荧光现象对傅立叶变换拉曼光谱分析的干扰

(4)在进行傅立叶变换光谱分析时，常出现曲线的非线性的问题

(5)任何一物质的引入都会对被测体体系带来某种程度的污染，这等于引入了一些误差的可能性，会对分析的结果产生一定的影响。

为什么拉曼光谱仪器不工作？

检查仪器和所有附件插座都插好并接通电源。

---激光器如果附带电源都插好并接通，由于激光器有不同种类，可参照每个激光器的说明书获取进一步的帮助。

在有两个或多个激光器的系统中，---联锁系统设置在正确的位置上，正确的激光器被接通。

检查仪器的外罩处于安全的关闭状态，联锁装置正在运转。

如果以上操作都已经检查过，你就可以准备进行光谱测试了。将样品放置在显微镜下，启动光谱操作软件，如果你仍不能得到光谱，检查下面各项。

---样品被正确地放置在显微镜下，即样品被准确地-并照射在样品正确的位置上。测量时经常需改变不同的测试区域以避免因样品不纯带来一些非期望结果的可能。

---激光正确辐照在样品上，---显微镜光圈的孔径设置正确并处于正确的位置上不同品牌的拉曼光谱仪按各自的要求处理。

检查所有软件窗口的设置是否正确。

检查成像区域设置窗口的数值并---激光像点处于该区域的中心。标准成像区域应该是激光像点中心垂直方向两边各10个像元。检查狭缝的设置，当进行标准操作时，狭缝应为50μm。

如果ccd探测器饱和了，你将得不到任何有用的信息。可采用降低激发光功率或提高仪器的共焦程度来避免。

当检查完上述各项后，你应该可以得到一张样品的拉曼谱图。如你仍然不能得到谱图，可先尝试测试单晶硅的拉曼谱。单晶硅是---的拉曼散射体，可以用来帮助验证仪器的性能。如果用单晶硅样品可以获取硅的520cm-1峰，再尝试测试样品。现在你可以得到样品的拉曼信号，但可能噪声较大。在这种情况下，可参照q4的建议来提高信噪比和信背比。

光谱仪的别名又称为分光仪，比较广泛的认知为直读光谱仪。光谱仪简单来说就是用来分解成分比较复杂的光谱线的一个仪器，它的组成部分就是有棱镜或衍射光栅等构成的，然后利用光谱仪可以测量需要被测量的物体表面反射的光线。

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