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液相色谱分析的流程

由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。

遇到复杂的混合物分离极性范围比较宽还可用梯度控制器作梯度洗脱。这和气相色谱的程序升温类似，不同的是气相色谱改变温度，而hplc改变的是流动相极性，使样品各组分在较佳条件下得以分离。

液相色谱仪的使用特点进行分析概要

　液相色谱仪是在---色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术中，流动相改为高压输送，色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效---高于---液相色谱；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。　　液相色谱仪特点：　　

1、高压：液相色谱法以液体为流动相，液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般可达150～350×105pa；　　

2、高速：流动相在柱内的流速较---色谱快得多，一般可达1～10ml/min。液相色谱法所需的分析时间较之---液相色谱法少得多，一般少于1h；　　

3、效率---：近来研究出许多新型固定相，使分离效率---提高；　　

4、高灵敏度：液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外，用样量小，一般几个微升；　　

5、适应范围宽

液相色谱的注意事项

---提示

1).流动相均需色谱纯度，水用20m的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2).柱子是非常脆弱的，首先做的方法，先不要让液体过柱子。

3).所有过柱子的液体均需严格的过滤。

4).压力不能太大，尽量不要超过150kgf/cm2.

5).因为缓冲试剂遇有机的溶剂，会结晶，有损色谱柱，所以，每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洗。

液相色谱法

色谱法的创始人是---的植物学家茨维特 m.tswett。1906年，---植物学家茨维特发表了他的实验结果：为了分离植-素，他将含有植-素的石油的醚提取液倒入装有碳酸钙粉末的玻璃管中，并用石油的醚自上而下淋洗，由于不同的色素在碳酸钙颗粒表面的吸附力不同，随着淋洗的进行，不同色素向下移动的速度不同，从而形成一圈圈不同颜色的色带，使各色素成分得到了分离。他将这种分离方法命名为色谱法(chromatography)。