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展开室应预饱和。为达到饱和效果，可在室中加入足够量的展开剂；或者在壁上贴两条与室一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封室顶的盖。
展开剂一般为两种以上互溶的溶剂，并且临用时新配为宜。
薄层板点样后，应待溶剂挥发完，再放人展开室中展开。
展开应密闭，展距一般为8～15cm。薄层板放入展开室时，展开剂不能没过样点。一般情况下，展开剂浸入薄层下端的高度不宜超过0.5cm。
展开剂每次展开后，都需要更换，不能重复使用。
展开后的薄层板用适当的方法，使溶剂挥发完全，然后进行检视。
rf值一般控制在0.3～0.8，当rf值很大或很小时，应适当改变流动相的比例。
多数有机化合物吸附碘蒸气后显示不同程度的黄褐色的斑点，这种反应有可逆及不可逆两种情况，前者在离开碘蒸气后，黄褐色的斑点逐渐消退，并且不会改变化合物的性质，且灵敏度也---，故是定位时常用的方法；后者是由于化合物被碘蒸气氧化、脱氢增强了共轭体系，因此在紫外光下可以发出---而稳定的荧光，对定性及定量都非常有利，但是制备薄层时要注意被分离的化合物是否改变了原来的性质。
物理显色法：
用紫外照射分离后的纸或薄层后，使化合物产生光加成，光分解、光氧化还原及光异构等光化学反应，导致物质结构发生某些变化，如形成荧光发射功能团。发生荧光增强或淬灭及荧光物质的激发或发射波长发生移动等现象，从而提高了分析的灵敏度和选择性。
光学检出法：
a自然光(400~800nm)
b紫外光(254nm或365nm)
c荧光一些化合物吸收了较短波长的光，在瞬间发射出比照射光波长更长的光，而在纸或薄层上显出不同颜色的荧光斑点(灵敏度高、专属性高)
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