TMB显色反应来电垂询「博特龙」
产品介绍
本产品用于蛋白质/抗0体的冷冻干燥。
运输、储存和有效期 常温运输(勿超过 30°c), 2-8°c 储存,在有效期内使用。 正常储存条件下自生产之日 起有效期 2 年。
使用方法
蛋白质/抗0体的冻干:将蛋白质或抗0体溶液与本产品按 1:1 混合冷冻干燥。
注意事项
本产品为无蛋白溶液,根据需要加 bsa,明胶或酪蛋白等,可以与本产品有协同作 用。
本产品的基质溶液为 0.01m ph7.4 pbs ? 本产品经过过滤除0菌,并添加 0.05%proclin300 作为防腐剂。
1.运输、储存和有效期
常温运输勿超过 30℃,2-8℃储存。正常储存条件下自生产之日起有效期 2 年。
2.操作方法
将标本与本产品室温孵育 10 分钟后,用 tris 或 pbs 冲洗。
3.注意事项
内源性碱性活性在很多细胞和组织中很强,如膀胱上皮细胞、卵0巢固有层、shen脏和唾液腺。小0肠碱性磷酸酶常见于在小0肠上皮细胞的刷状缘;人0胎0盘的碱性磷酸酶常见于胎0盘合体滋养层细胞的微绒毛;在细胞涂片中,碱性磷酸酶见于嗜中性分割细胞,嗜中性带细胞,和嗜中性晚幼粒细胞。碱性磷酸酶也见于慢性和---粒细胞白0血病以及某些嗜中性粒细胞白0血病反应。
加生物素化抗0体
1. 去掉缓冲液,擦掉切片周围的液体。
2. 加生物素化抗0体,完全覆盖切片。
3. 室温孵育 30min。
4. 用洗涤液洗去抗0体,用洗涤液润洗 5min。
加亲合素-hrp
2. 加亲合素-hrp,完全覆盖切片。
4. 用洗涤缓冲液洗去亲合素-hrp,用洗涤缓冲液润洗 5min。
显色
1. 加显色液自备显色。
可能出现的问题和解决方法
过度染色
1. 没有有效封闭内源性---化物酶。
2. 不完全脱蜡。
3. 过度组织粘附。
4. 一抗稀释度不当。
5. 蛋白质非特---结合。
不染色
1. 忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-hrp。
2. 处理过程中抗原破坏。
3. 固定不当。
4. 用含---钠洗涤液。
5. 操作过程中样品彻0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色较弱
1. 加免0疫试剂前没有将洗涤液去掉。
2. 抗0体稀释不当。
3. 显色前底物放置时间过长。
4. ---0---的破坏作用。
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