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肺缺血再灌注损伤是由于机体组织或在缺血再灌注后导致肺组织迅速损伤。缺血再灌注可能发生在肺，也可能是下肢或腹主动脉等，导致肺泡上皮细胞和肺毛细胞血管内皮细胞受损。

究其原因可能与组织细胞---、氧自由基产生和促炎因子释放等病理生理反应有关。

结扎法制备肺缺血再灌注损伤模型常用，因其操作简单、成功率高、实用性强，是研究肺缺血再灌注损伤发病机制和---保护的关键。

制备肺缺血再灌注模型我们选用适龄的sd大鼠，通过结扎手术进行造模。

　ssc=150mmnacl,15mm柠檬酸钠溶液(ph7.4)

　　hcl处理：对样本进行20-30min的200mmhcl处理，可将蛋白抽提，并将---序列进行一定程度的水解，增加杂交检测的信噪比。

　　去垢剂处理：如果对样品的固定、脱水、包埋等预处理过程不---将脂膜成分破坏暴露---，可对样品进行额外的蛋白去垢剂处理(如tritonx-100和sds)。

　　蛋白酶处理：样品中待杂交的---序列常与蛋白缠绕交联在一起，样品的固定步骤更是加剧了蛋白的交联程度，因此预渗透是---杂交前的常规步骤，通常通过蛋白酶k的---作用来完成。根据不同的文献来源，蛋白酶k的工作浓度通常设为10-500μg/ml(溶解于20mmtris-hcl,2mmcacl2,ph7.4,酶浓度可根据具体样品进一步优化)，对样品进行37°c7.5–30min的处理。染色体涂片或核片的蛋白酶k处理浓度可降至1μg/ml---7.5min。也有文献-，固定石蜡包埋的组织切片样品，使用胃蛋白酶500μg/ml，溶于200mmhcl将得到较好的蛋白---结果。

　有关动物实验室检测的要求及标准

　　动物实验室又叫动物房，是指适宜于饲养、繁育实验动物的建筑物。这类建筑应具有特定的环境要求和实验手段，以---动物的品质和实验研究的准确---性。建设动物实验室时有着不一样的要求及标准，今天咱们主要来看看动物实验室建设的标准有哪些？

　　1．spf级动物实验室：

　　spf及动物实验室符合动物居住的要求，严格控制人员、物品和空气的进出，适用于饲育清洁级或无特定病原体级实验动物。经过的监测中心检测，通过现场验收的屏障环境，才可以作为清洁级或spf级动物的饲养环境。

　　2．实验室动物房|动物实验室|动物研究室分类及标准：

　　实验室根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级，分别是普通动物、清洁动物、无特殊病原体动物、无菌或栖生动物。

肝纤维化动物模型造模方法：

1.法：

性肝纤维化产生的机理是ⅲ型反应引起，白蛋白和的大分子物质，作为异种抗原进入大鼠体内后，---其产生相应的，当抗原再次进人机体后抗原结合，形成抗原—复合物(ic)，抗原的反复、长期---，过量的复合物来不及被清除，沉积于的血管壁内外，引起血管炎，造成肝损伤。反复导致肝细胞变性、坏死，再生，纤维等变化，后发展为肝纤维化、。

动物选用雄性wistar大鼠，体重130g左右。取猪0.5ml，腹腔内注射，每周2次，共8次(猪的制备：取新鲜猪血，离心制，滤过，分装放低温冰箱备用)。

评价:

大鼠第3周出现肝细胞变性、坏死，第4周的胶原纤维形成纤维束，从中央静脉到门管区之间相互伸延，发生纤维化。