动物生化指标检测-「思特进」

肺缺血再灌注损伤是由于机体组织或在缺血再灌注后导致肺组织迅速损伤。缺血再灌注可能发生在肺，也可能是下肢或腹主动脉等，导致肺泡上皮细胞和肺毛细胞血管内皮细胞受损。

究其原因可能与组织细胞---、氧自由基产生和促炎因子释放等病理生理反应有关。

结扎法制备肺缺血再灌注损伤模型常用，因其操作简单、成功率高、实用性强，是研究肺缺血再灌注损伤发病机制和---保护的关键。

制备肺缺血再灌注模型我们选用适龄的sd大鼠，通过结扎手术进行造模。

(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的hbss液的平皿中( 下置冰袋)。

(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。

(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小，---液37℃---15-20min，每五分钟振荡一次；

(4)去掉上清，加入终止液终止---，吹打10-15次，不能有气泡，收集上清，剩余组织再---一次。

(5)4℃1000rpm离心10min，弃上清，加入种植液1重悬，培养箱内差速贴壁30min；

(6)收集上清，台盼蓝染色计数，按6*105cells/孔种入六孔板种植液1，37℃，5%co2，95%饱和湿度的培养箱中培养；

(7)培养第二天，全换液更换为种植液2；

(8)培养第四天，半量换液加入5um的，24h全量换液；

(9)之后每周换液两次。

1、致模因素对动物模型的影响

应明确研究目的，清楚相应人类---的发生、------和发病机制，熟悉致病因素对动物所产生的------和发病情况，致病因素的剂量。

2、动物因素对动物模型的影响  

品种、品系、年龄体重、性别、生理状态等

3、实验技术因素对动物模型的影响

实验季节、昼夜过程、---、手术技巧、实验给药、对照组的影响等。

4、环境因素和营养因素对动物模型的影响

模型的成败往往与环境的改变有密切关系。拥挤、饮食改变、过度光照、噪音、屏障系统的破坏等，任何一项被忽视都可能给模型动物带来---影响。