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肺缺血再灌注损伤是由于机体组织或在缺血再灌注后导致肺组织迅速损伤。缺血再灌注可能发生在肺,也可能是下肢或腹主动脉等,导致肺泡上皮细胞和肺毛细胞血管内皮细胞受损。
究其原因可能与组织细胞---、氧自由基产生和促炎因子释放等病理生理反应有关。
结扎法制备肺缺血再灌注损伤模型常用,因其操作简单、成功率高、实用性强,是研究肺缺血再灌注损伤发病机制和---保护的关键。
制备肺缺血再灌注模型我们选用适龄的sd大鼠,通过结扎手术进行造模。
样品预处理
在待测样品中,dna或rna通常都是被蛋白包裹缠绕,根据不同的细胞和组织样品的应用,可选择合适的预处理方法将靶---暴露:
内源性酶灭活:如果探针的检测是通过酶促法进行的,则样品内相应的内源性酶必须被灭活。如内源性的pod可通过含1%h2o2的---处理30min。如果检测酶为ap,可在底物溶液中加入左旋咪唑,ap检测的内源性背景一般来说比pod检测的低得多,因为在杂交过程中,样品中内源性ap酶的活性基本都丧失了。
rnase处理:在dna-dna杂交实验中,rnase的处理可去除内源性rna,增加实验的信噪比。在进行mrna为靶标的检测时,rnase处理的样品也可作为质控对照。通常的处理方式是将dnase-free的rnase溶解于2×ssc(100μg/ml),样品在溶液中37℃处理60min。
动物实验发展的目的,就是要通过对动物本身生命现象的研究,进而推用到人类,探索人类的生命奥秘,控制人类的---和衰老,延长人类的寿命。随着医学生物科学的突飞猛进发展,认识到公害问题不仅已成为粮食、人口、老年人等的重大社会问题,而且还涉及到地球上生活着的动物生存问题,例如产业公害、食品公害、---毒性等,均直接影响人体健康,对这些问题的研究,必然要通过动物实验(包括动物---模型的开发等)来阐明解决。因此,实验动物科学,---是实验动物的重要性愈来愈被人们所认识,它已被认为是人类追求幸福生活的支柱,故实验动物科学亦被称之为生命科学;为此,---对实验动物科学的发展,均给给予高度的重视,其投入的经济物资和技术力量,几乎可同发展原子能科学相提并论,其重要意义可想而知。
肝纤维化动物模型化学性损伤法:
雄性wistar大鼠,体重130g左右,用腹腔内注射,次20mg/100g体重,从第二次起12mg/100g体重,每周注射2次,共8周。
评价:第3周,在肝小叶间中间带出现大片的肝细胞变性坏死和炎细胞浸润,炎细胞浸润、坏---数和程度超过猪模型。6周后出现纤维束,纤维晚于和少于猪模型。大鼠肝纤维组织中有i型胶原的mrna增多。
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