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辽宁荧光型WLRN8209KIT试剂盒批发-「立博泰业」

发布者:北京立博泰业科技有限公司  时间:2022-8-20 






恒温扩增试剂盒

本试剂盒可以用于rt-lamp等温扩增,rt-lamp即逆转录和loop-mediated isothermal amplification(环介导等温扩增)的结合,专门用于快速扩增rna。lamp是2000年才出现的一种新颖的等温---扩增方法。它利用4或6条模板专一的特异引物和具有链置换能力的dna聚合酶,在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特---和检测范围等指标上能---甚至优于rt-pcr技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、---、---等病原体的快速检测。




恒温扩增试剂盒产品特点


产品特点:

1.高特---,由于同时使用4-6条特异引物,所以特---比rt-pcr更高。

2.高扩增效率,扩增效率可达到10e9-10e10,比pcr灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的rna分子

3. 65℃左右完成rt和lamp扩增,不需要贵重的热循环仪。

4. 即开即用,包含了除引物和模板rna外的所有成份,十分方便。

5. 肉眼检测扩增结果,不需要昂贵的电泳、荧光pcr等仪器。

6. 提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。








恒温快速扩增试剂盒常用酶原料

尿dna糖基化酶尿dna糖基化酶(udg酶)又称尿-n-糖基化酶(ung酶),可水解含尿的单链和双链dna释放出游离尿,而对rna无活性,与dutp搭配使用,可建立成pcr防污染体系。其原理如下:在pcr体系---dttp部分或全部替换为dutp后,使得反应生成含有du碱基的扩增产物,这些扩增产物不同于天然模板,在进入含有udg酶的反应体系时,可被udg酶识别并切割尿碱基与糖磷酸骨架间的n-糖基键,而经切割后的dna链在碱性或高温条件下易于断裂降解,从而失去被当作模板再扩增的能力,因此可防止扩增子污染如下图。市面上的udg酶主要有普通型和热敏型,其中热敏型udg酶在室温条件下即可催化反应,50℃以上加热可使其灭活,防止其降解后续pcr形成的含du扩增产物。虽然udg/dutp体系具有防污染功能,但在实际测试中还得---pcr的效率和灵敏度。一方面需---pcr扩增产物掺入足够量的尿碱基,从而可被udg有效切割;另一方面也需要---反应体系添加的dutp不会明显影响pcr效率,因此dttp和dutp的佳比例需通过优化确定。



恒温扩增试剂盒设计及储存

荧光探针设计:

在上下游引物中间,设计- -段长度为46-52nt与目的片段互补的序列作为荧光探针;

探针序列不与特---引物识别位点重叠,长度为46-52 nt ,序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。


试剂盒储存:

运输条件:低温运输;

储存条件:储存温度≤-20°c ,避光保存,避免重压、反复冻融:

产品有效期: 12个月。






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