原位杂交仪制造厂家承诺守信「在线咨询」

发布者：武汉思特进科技发展有限公司时间：2022-8-26

原位杂交技术应用于染色体、细胞和组织切片等样品中进行---特---检测，与免6疫组化技术的结合应用，能将dna、mrna和蛋白水平上的基因活性与样品的显微拓扑信息结合起来。1969年pardue和gall将放9射性标记的探针直接应用于纯化---的杂交，此后得益于分子克6隆技术的发展，及不同探针标记系统和检测系统的应用，---增加了原位杂交检测的应用灵活性和检测灵敏度。

原位杂交中探针的选择

dna探针、rna探针和寡核苷酸探针均能通过不同的酶促分子反应进行标记。寡核苷酸探针的长度较短，因此避免了探针内部退火的问题，在杂交时的渗透能力也---，探针与靶标的接触这是影响原位杂交是否成功的重要因素之一。dna探针、rna探针在合成时需要控制探针片段长度，通常300-1000bp左右，能覆盖到较长片段的靶---序列，增加检测的灵敏度。

使用分支dna信号扩增的rna fish

invitrogen? viewrna?和primeflow?检测是使用分支dna信号扩增 (bdna) 来检测特---信号的直接荧光rna ish方法。使用独立但兼容的信号扩增系统让rna靶标的多重复用成为可能。荧光rna原位杂交检测分为四个主要步骤：样本制备、靶标杂交、信号扩增以及检测。该方法可实现更高的特---，---的背景值和更高的信噪比。

根据不同的杂交实验要求，应选择不同的---探针。在大多数情况下，可以选择克0隆的dna或cdna双链探针。但是在有些情况下，必须选用其它类型的探针如寡核苷酸探针和rna探针。例如，在检测靶序列上的单个碱基改变时应选用寡核苷酸探针，在检测单链靶序列时应选用与其互补的dna单链探针通过克0隆人m13噬菌体dna获得或rna探针，寡核苷酸探针也可。长的双链dna探针特---较强，适宜检测复杂的靶核苷酸序列和病原体，但不适宜于组织原位杂交，因为它不易透过细胞膜进入胞内或核内。在这种情况下，寡核苷酸探针和短的pcr标记探针80～150bp具有较大的---性。

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