邯郸BRUKER傅立叶拉曼公司- 泰科施普

拉曼光谱在生物学研究中的应用    

拉曼光谱是研究生物大分子的有力手段，由于水的拉曼光谱很弱、谱图又很简单，故拉曼光谱可以在接近自然状态、活性状态下来研究生物大分子的结构及其变化。

生物大分子的拉曼光谱可以同时得到许多-的信息：

1蛋白质二级结构：α-螺旋、β-折叠、无规卷曲及β-回转

2蛋白质主链构像：-ⅰ、ⅲ，c-c、c-n伸缩振动

3蛋白质侧链构像：-氨酸、酪氨酸、色氨酸的侧链和后二者的构像及存在形式随其微环境的变化

4对构像变化敏感的羧基、巯基、s-s、c-s构像变化

5生物膜的脂肪酸碳氢链旋转异构现象。

6dna分子结构以及和dna与其他分子间的作用。

7研究脂类和生物膜的相互作用、结构、组分等。

8对生物膜中蛋白质与脂质相互作用提供重要信息。

激光拉曼光谱原理

激光拉曼光谱是一种测定物质分子成分的微观分析技术，是激光光子与宝石分子发生非弹性碰撞后，改变原有入射频率的一种分子联合散射光谱，通常将这种非弹性碰撞的散射光谱称之为拉曼光谱。波数的改变量即为拉曼位移，拉曼位移由宝石分子结构的振动能级所决定，而与辐射光源无关，这即为拉曼效应的基本内涵。

拉曼光谱仪怎样避免被测试的样品被激光烧毁？

当你进行样品测试时，激光照射在样品表面的能量是非常大的，尤其在采用nir或uv激光激发时。尤其是一些样品在光照下对热或光是十分敏感的，这会导致测量信号包含样品烧毁后的特征，而不是样品本征的信号(例如，非晶碳膜在1500cm-1波数附近的本征峰在强光激发时会显示出石墨化的碳峰)。通常遇到这样的问题时，可在样品测试前后通过显微镜白光像观察样品表面是否发生明显变化，因此需选择正确的激光功率来进行测试。

为避免样品表面烧毁，在开始测试时应选用较低的激发功率，尤其用nir或uv激光激发时。在-样品不被烧毁的前提下可提高激发功率以得到很强的信号。当激光功率衰减到1％仍无法避免样品烧毁时，可考虑转换低倍物镜以降低照射在样品表面的功率密度。另外还可采用欠焦照射模式或线-照射模式。如果问题是由于高功率二极管激光器引起的，可考虑转换成低功率可见激发系统。