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quickantibody-mouse5w 5周标准鼠单抗/多抗制备佐剂
quickantibody-mouse5w用途
通过5周2针的标准免0疫程序制备小鼠单克0隆和多克0隆抗0体,elisa滴度cutoff值为0.1000可达到1:10000-1:10000000。
quickantibody-mouse5w使用方法详见使用说明书
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度按每针次50μl用量配制。
备注:使用的抗原用量为
1免0疫原性较强的灭活全-或全-以及-样颗粒抗原每针次1-5μg;
2免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg;
3偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。
2. 充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量按每针次50μl与抗原按体积比1:1迅速混匀。
备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。
饲养层细胞制备
于细胞融合前-,准备饲养层细胞,常选用小鼠腹腔渗出细胞,其中主要是巨噬细胞和淋巴细胞。应用腹腔渗出细胞的好处是: 一方面做饲养细胞,另一方面巨噬细胞可以吞噬死0亡的细胞和细胞碎片,为融合细胞的生长造成-的环境。腹腔细胞的数目应适宜,过少则不能提供杂交瘤细胞所需要的生长因子,过多会阻碍杂交瘤细胞的贴壁,一般以铺满孔底 30% 为好。
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甲胎蛋白(afp)是一种胎儿特-糖蛋白,分子量约70,000~72,000道尔顿,在胚胎肝0脏和卵黄囊中合成,正常人血中含量甚微。1972年有人首0次-开放性神0经管畸形胎儿、羊水中有高水平的afp。若胎儿羊水中afi值高于均值常见于患无脑儿或脊柱裂的胎儿,亦见于其他多种畸形,如先天0性shen病、食道或肠闭锁、囊0性水瘤、骶尾部畸胎瘤、rh血型不和、-、先0天性性腺发育不全等∽j。1983年发现母体血0清afp水平的降低与唐氏综合征有密切关系一。。因此制备高0效特异的afp单克抗0体(mcab)具有重要的意义。
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