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拉曼光谱在生物学研究中的应用    

拉曼光谱是研究生物大分子的有力手段，由于水的拉曼光谱很弱、谱图又很简单，故拉曼光谱可以在接近自然状态、活性状态下来研究生物大分子的结构及其变化。

生物大分子的拉曼光谱可以同时得到许多-的信息：

1蛋白质二级结构：α-螺旋、β-折叠、无规卷曲及β-回转

2蛋白质主链构像：---ⅰ、ⅲ，c-c、c-n伸缩振动

3蛋白质侧链构像：---氨酸、酪氨酸、色氨酸的侧链和后二者的构像及存在形式随其微环境的变化

4对构像变化敏感的羧基、巯基、s-s、c-s构像变化

5生物膜的脂肪酸碳氢链旋转异构现象。

6dna分子结构以及和dna与其他分子间的作用。

7研究脂类和生物膜的相互作用、结构、组分等。

8对生物膜中蛋白质与脂质相互作用提供重要信息。

拉曼光谱仪为什么待测样品的信号很弱？信噪比很差？

当进行样品测试时发现拉曼光谱信号很弱，首先要检查样品是否正确放置在显微镜下并且处于---状态。你也可以将测试区域移到样品的另一个部位。同时检查仪器是否处于常规状态而不是处在共焦状态。如果激光功率小于100％，应尝试提高功率增强信号。如果光谱噪声很大，可采用增加扫描积分时间或积分次数来提高信噪比。

增加扫描积分时间可以让ccd获取更多的拉曼信号，增强整个无关噪声的特征。该法适宜于当背景和拉曼信号都低的情景。当两者都不强时，增加积分时间只会增加ccd探测器饱和的机会。

对几个特定的扫描光谱进行数据叠加可以增强随机背景噪声下的拉曼信号，增加信噪比。

适当选择扫描积分时间和积分次数可获得很大可能的---度增加信噪比。不过要注意一点：信噪比跟积分次数的平方根成正比，叠加四次可获得二倍信噪比的提高。

另一个与信噪比密切相关的参数是信背比。如果背景部分---，将会湮盖拉曼信号只给出系统噪声。

拉曼光谱仪

拉曼是一种光散射技术。激光光源的高强度入射光被分子散射时，大多数散射光与入射激光具有相同的波长(颜色)，不能提供有用的信息，这种散射称为瑞利散射。然而，还有一部分(大约1/109)散射光的波长(颜色)与入射光不同，其波长的改变由测试样品(所谓散射物质)的化学结构所决定，这部分散射光称为拉曼散射。

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