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三、实验指标区域指标开臂1停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度开臂2停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度开臂3停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度其他臂停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度四、实验方法及应用
1) 动物适应实验环境1周后,称重,禁食24小时。此后每天训练结束后---性地给予正常食料据体重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g,以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。
2) 第二天,迷宫各臂及中央区分撒着食物颗粒每只4~5粒,直径约3~4mm。然后,同时将4只动物置于迷宫中央通往各臂的门打开。让其自由摄食、探究10min。
3) 第三天,重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。
4) 第四天起,动物单个进行训练:在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒,让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。
5) 第五天,将食物放在食盒内,重复前---的训练,---2次。
6) 第六天以后,随机选4个臂,每个臂放一颗食粒;各臂门关闭,将动物放在迷宫中央;30s后,臂门打开,让动物在迷宫中自由活动并摄取食粒,直到动物吃完所有4个臂的食粒。如经10min食粒仍未吃完,则实验终止。每天训练两次,其间间隔1h以上。
注意事项
1. 针头大小与动物的种类有关,t 同时针头一定要磨钝。
2. 检查灌注泵的运作情况,一定排出管子的气泡和空气,防止空气栓塞。
3. 经腹腔暴腔,先清楚升主动脉外面的脂肪组织和心外膜组织。
4. 将针头经左心室插入升主动脉颜色变白的哦,并用钳子固定。
5. 解开右心耳,同时开启灌注泵。注意,不要---揭开---的其他部位,否则有时候可能会灌注成功但是绝大部分会造成灌注不成功,尤其。
6. 将 4 度的生理盐水好已动物的发白为标准,我们实验室的大鼠约用 250ml和--- (根据所取得材料而定) 依次灌入。
7. 整个过程均应将动物放在冰上,以便于---地保存目的蛋白和酶的活性。
动物睡眠剥夺模型,睡眠剥夺是研究睡眠的功能与发生机制的重要方法。睡眠剥夺模型的选择将直接影响睡眠剥夺实验的---性及准确性对睡眠剥夺实验结果具有重要的影响。现将几种常用的睡眠剥夺模型的方法评价及进展情况综述如下。
1.平台睡眠剥夺技术
此类方法主要是利用大鼠畏水及在水中无法进入睡眠的生活习性,通过在盛水的水槽中放置平台,让大鼠站立在平台上,因平台直径足够小(直径 6.5 cm 或更小)当大鼠进入 rem 时,因全身肌张力降低引起节律性低头触水以此来达到剥夺 rem 的目的, 此类方法简单易行无需复杂昂贵的设备,在不同条件的实验室均能开展因而应用广泛 其主要用来剥夺大鼠的rem ,可分为以下三种方法:
1.1单平台睡眠剥夺法
此方法早于 1964 年被应用在猫的睡眠剥夺实验中,不久以后有人将此方法应用于大鼠的睡眠剥夺实验,,方法为将一圆柱形台 (直径约 65 m m )放置在长 400 mm宽340 m m高160 mm的水槽中,往水槽中加水至平台露出水面约 10 mm ,将 1 只大鼠置于台上,大鼠可在平台上站立,可进入 nrem,当大鼠进入 rem 时全身骨骼肌张力明显降低,颈部肌张力降低引起节律性低头触水从而无法进入 rem,采用 sp 实验可引起动物的体重及胸腺重量减轻,上腺重量增加,血浆中上腺皮质酮增加,动物攻击行为增加,机体反应抑制等。
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