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{微生物检测}常规鉴定技术

{微生物检测}常规鉴定技术一

(一)形态结构和培养特性观察

1、微生物的形态结构观察主要是通过染色，在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构(包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等)及染色特性进行观察，直观地了解-在形态结构上特性，根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。

2、-细胞在固体培养基表面形成的细胞群体叫菌落(colony)。不同微生物在某种培养基中生长繁殖，所形成的菌落特征有很大差异，而同一种的-在一定条件下，培养特征却有一定稳定性。以此可以对不同微生物加以区别鉴定。38-2012食品安全标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数gb4789。因此，微生物培养特性的观察也是微生物检验鉴别中的一项重要内容。

-效力

黑曲霉菌悬液：操作时关闭空调系统及洁净工作台风机。接种黑曲霉的新鲜培养物至沙氏-琼脂培养基中，23～28℃培养5～7天，加入3～5ml含0.05%ml/ml聚山梨酯80的0.9%无菌-溶液，将孢子洗脱，然后，用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%ml/ml聚山梨酯80的0.9%无菌-溶液稀释至           ，用比浊法制成每1ml含孢子数108cfu的孢子悬液。5、厌氧法在实验室中，为了分离某些yanyangjun，可以利用装有原培养基的试管作为培养容器，把这支试管放在沸水0浴中加热数分钟，以便逐出培养基中的溶解氧。

-效力-菌液制备

-效力-菌液制备

取大肠埃希菌、金黄色putao球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物用 ph7.0 无菌--蛋白胨缓冲液或 0.9%无菌-溶液制成 适宜浓度的菌悬液。取表 2 黑曲霉的新鲜培养物加入 3～5ml 含 0.05％ml/ml聚山梨酯80 的 ph7.0 无菌--蛋白胨缓冲液或 0.9%无菌-溶液，将孢子洗脱。而对于金黄色葡萄qiu菌在速冻食品中的存在量，ws部于2011年11月24日公布食品安全-《速冻面米制品》，允许金葡菌-存在。然后，采用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含 0.05％ml/ml聚山梨酯80 的 0.9%无菌-溶液制成适宜浓度的孢子悬液。

菌液制备后若在室温下放置，应在 2 小时内使用；若保存在 2～8℃，可在24 小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在 2～8℃，在验证过的贮存期内使用。

微生物计数

3.滤膜法

滤膜法是当样品中菌数很低时，可将一定体积的湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色，并经处理使膜透明，再在显微镜下计算膜上(或一定面积上)的-数。

此法也可以通过培养观察形成的菌落数来推算样品中的菌数。例如测定饮用水中大肠gan菌的数目:将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。2、液体石蜡法指将junzhong接种在适宜的斜面培养基上，适条件下培养好后注入灭的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，再直立放置于低温(4～6℃)干燥处进行保存的一种保藏方法。在该培养基上大肠gan菌的菌落呈现黑色，可根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠gan菌的数目。

此法也是统计样品中活菌的数目。

4.比浊法

原理是在一定范围内，菌是悬液中细胞浓度与混浊度成正比，即与光密度成正比，菌越多，光密度越大。因此可借助与分光光度计，在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度表示菌量。实验测量时一定要控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内，否则不准确。

5.显微镜直接计数法

在课本生物选修1生物技术实践p22中“除了上述活菌计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。”这里说的显微镜直接计数，我认为应该是在稀释涂布的基础上不培养成菌落而通过染色的方法在显微镜下直接计数。如果要分离一些专性寄生菌，就必须把样品接种到相应敏感宿主细胞群体中，使其大量生长。再如滤膜法也一样，可以有两种情况。

另外，微生物计数法发展迅速，多种多样的快速、简易、自动化的仪器和装置等方法可以用来统计微生物的数目。