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elisa试剂盒的应用技术

elisa检测试剂盒应用定性夹心检测技术，用合成的hev多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型hev---酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该-的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在hev igm，这些就会与hev 的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特-和样品中的其它成份。然后加入羊抗人igm-hrp辣根-化物酶酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与孵育结合上的hev igm相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入tmb底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有hev igm和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入-溶液终止酶和底物间的反应，并在波长: 450nm处测量o.d.值,按照本hev igmelisa试剂盒的测试标准, o.d.值大于或等于cut-off值的样品被认为是初试阳性。

elisa试剂盒的操作方法——间接法

以下是北京中检维康生物技术有限公司为您一起分享的内容，北京中检维康生物技术有限公司供应elisa试剂盒，欢迎新老客户莅临。

1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；

2.次日洗涤3次；

3.加一定稀释的待检样品未知0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；

4.同时-白、阴性及阳性孔对照于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗0.1ml；

5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；

6.然后用ddw洗涤。

其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。

elisa试剂盒——会出现的问题及解决办法

标准曲线线性不佳，或是平行性不好。

a.原因：温育位置避光不好或受到气流干扰。

解决办法： 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。

b.原因：操作时间拖太久。

解决办法：请在方法熟练后再进行操作。

c.原因：微孔间相互污染。

解决办法： 加样品时，请小心勿溅出微孔外，以免造成其它微孔的污染。

d.原因：标准品或酶标记物所加入的量不一致。

解决办法：请使用已校正过的移液枪，并-其与吸头之间有高度密合性。

e.原因：添加样品或试剂的操作方法不正确。

解决办法：加样品或试剂时，吸头请勿接触微孔。

f.原因：洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未-进行下一步骤)。

解决办法：请随时监控洗板过程，洗完后立即进行下一步骤。