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阑尾炎动物模型

方法  成年大鼠，后固定，无菌条件下开腹，将阑尾及末端回肠和与阑尾系膜相连的肠段(下称临近肠段)移出腹腔并置壁上。剪开阑尾尖部的阑尾系膜，把阑尾尖部肠内容物挤至阑尾近端肠腔内，距尖部1cm处用1号丝线将阑尾管攀结扎。把结扎了的阑尾尖部摆放在回肠根部和临近肠段之间。用小圆针细丝线(000号)把回肠根部和临近肠段相应位置缝合一针(仅穿透浆肌层)，后将结扎阑尾包埋于其下。再顺续沿末端回肠由远端至近端与临近肠段相应位置紧密缝合1～2针，将阑尾全部包埋在缝合的肠段之下。将外置的全部肠段送入腹腔，两层缝合关腹，无菌纱布包扎伤口，送回笼中饲养观察。洛桑瑞士联邦技术学院的gregoirecoultine是这项研究的主要研究者。或成年家兔，后固定于手术台架上，备皮消毒铺巾后，无菌条件下腹正中切口开腹6cm，寻及盲肠提出阑尾，于阑尾根部以4号丝线紧贴阑尾壁穿过系膜结扎阑尾，随后将阑尾纳回腹腔，逐层关腹。术后，在规定的时间点测定动物体温，行坏死阑尾炎腔内容物-培养，包囊或坏死阑尾大小的检测，以及肉眼病理观察和组织形态学改变的镜检。

特点  大鼠术后15d，阑尾呈脓性坏死，外裹一层纤维性包囊，囊内含有大量的-，模型成功率高。兔术后6～12h，阑尾充血、增粗、水肿；12～24h时，阑尾肿胀、增粗更为明显，外被脓苔与周围肠管粘连，部分阑尾壁可见斑点状出血灶，腹腔内有脓性渗液出现。与阑尾脓苔粘连的周围肠管亦呈明显的水肿、充血，甚或有阑尾系膜形成。腹腔渗液-培养有大肠生长。术后24h，兔体温可升至40℃左右。实验动物大、小鼠的采血方法1、动物实验中剪尾采血：需血量少时可用此方法。在整个造模过程中，模型动物神态萎靡，不食不饮，腹部胀满，2～4d内陆续。

前lie腺素e2对大鼠巨噬细胞株nr8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响

　　方法：分别采用0.1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2+10 nmol/l ep2受体抑zhi剂ah6809+10 nmol/l ep4受体抑zhi剂ah23848 处理的nr8383 细胞作为各实验组，选择未经pge2以及其特-受体抑zhi剂处理的nr8383 细胞作为对照组，采用western blot 和qpcr方法检测各组nr8383细胞内vegf蛋白以及mrna的表达水平；(三)法：用七号或八号针头蘸取少量碳素墨水，在耳部、前后肢以及尾部等处刺入皮下，在受刺部位留有一黑色标记。收集以上各处理组的细胞培养上清液分别-1huvecs，运用transwell 小室、matrigel 胶细胞成管实验等实验方法，观察pge2调控巨噬细胞对huvec 迁移效应和成管能力的影响。

　　结果：随着nr8383 细胞培养液中加入pge2浓度增gao，其 vegf蛋白表达和vegf mrna的表达水平-升高p<0.05；0.1 nmol/l、1 nmol/l pge2处理过的nr8383细胞培养上清液可以-增加huvec细胞形成的小管面积，形成小管面积随着pge2处理浓度的增加而增加p<0.05；瑞士洛桑联邦理工学院的silvestromicera博士补充说：英国“废除解剖学”的jarrodbailey博士对此研究表示谴责。huvecs的迁移运动也随着pge2处理浓度的升高不同程度的增强，huvecs趋化的数量-升高p<0.05；研究发现pge2特-的ep2/ep4 受体拮抗剂ah6809/ah23848，可以-抑制pge2 增强nr8383 细胞内vegf mrnas 表达的作用并且也-抑制pge2 增强 nr8383细胞促进huvecs成管和趋化能力的效应p<0.05。

1.2 实验方法优势

这种实验方法相对于被动回避穿梭实验、避暗实验等实验的优点在于：这种迷宫利用了啮齿类动物对新异环境天然探究的自然习性，不需要动物学习任何规则来趋利避害，能够有效地反映出动物对新异环境的识别记忆能力。

2、电-y迷宫测试原理

 该测试方法更多的应用于检测实验动物空间辨别的学习记忆能力。

2.1 电-y迷宫使用方法

y 迷宫由3 个相同的臂组成,分别称为ⅰ区、ⅱ区、ⅲ区。通常把下臂( ⅰ臂)定为起步区,左侧( ⅱ臂) 为安全区,右侧( ⅲ臂) 为区,三臂相交处为隔离区(0 区) 。迷宫底铺以铜棒,可以通电-。三臂顶端各装有15w 的信号灯。实验前先将大鼠放入迷宫,让其适应5 min ,训练组大鼠在起步区予以致其逃至安全区,灯光持续15 s ,然后熄灯休息45 s ,开始下一次操作。每次实验在每只大鼠上重复20 次为一轮。实验在-、安静的环境中进行。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠固定。凡大鼠受后10 s 内-从起步区逃至安全区的反应称为“正确反应”,否则为“错误反应”。以连续10 次中正确反应达9 次或以上定为学会标准。达到学会标准所需的次数表示学习记忆成绩,次数少说明学习能力强。

y迷宫主要应用于动物的辨别性学习，工作记忆及参考记忆的测试。y迷宫由三个完全相同的臂组成。每个臂尽头有食物提供装置，根据分析动物取食的策略即进入各臂的次数、时间、正确次数、错误次数、路线等参数可以反映出实验动物的空间记忆能力。6、-采血：将动物，使其仰位固定，剪去胸前区毛，消毒皮肤，在左侧第3—4肋间选择心博强处穿刺，-借-跳动的力量进入。相对而言，y迷宫简便、可行，相对八臂迷宫来说简单，有一定的实用性，现常用于学习记忆功能评价。

y迷宫、八臂迷宫这类食物奖赏型迷宫任务能够检测啮齿类动物与海马和前额叶脑区相关的空间参考记忆和空间工作记忆。当动物在迷宫中寻找食物时，动物需要根据迷宫周围的视觉标示，记住它已搜寻过的迷宫臂，以避免重复进入同一个臂，从而有效地获得食物。造模后14d，行闪光视觉诱发电位检测，处死大鼠取眼球，观察各组大鼠视wang膜和视神经的病理形态，行视wang膜神经节细胞计数。这种类型的记忆能指导进行中的行为，被称为工作记忆。

  y迷宫实验模型用来研究啮齿类动物的空间识别记忆能力，这相对于被动回避等实验的优点在于：这种迷宫利用了啮齿类动物对新异环境天然探究的自然习性，不需要动物学习任何规则来趋利避害，能够有效地反映出动物对新异环境的识别记忆能力。