实验操作小贴士
1、实验应在超净工作台或者生物安全柜内进行;
2、实验的过程中选择尺寸的手套并能及时更换,在进出不同实验区域或进行模板操作后都应更换实验服、口罩、帽子及手套,以避免不同实验区交叉污染;
3、装有pcr试剂的反应管在打开之前应先瞬时离心,将管壁及管盖上的液体离至管底,降低污染手套或加样器的风险;谨慎开启反应管,防止管内液体溅出或形成气溶胶导致污染;需要高温加热的样本,可采用封口膜进行pcr管盖密封,避免管盖应受热而发生弹开;
4、吸加试剂和模板的操作应严格按照规范要求进行,遵守“慢吸快打”原则,尽量-完成,忌多次抽吸,以避免气溶胶产生的交叉污染;
5、pcr试剂建议小量分装,以减少反复冻融、重复取样次数和反复使用过程中的试剂污染;多样本pcr反应时,先配制反应混合液分装至反应管中,加入样本-,请勿同时开盖,尽量-单人单管,实现完全闭管操作;
6、实验试剂应与样品和pcr产物分开保存,不应放于同处;
7、pcr扩增实验完成后及时将反应管取出,用-手套或者塑封袋将产物反应管包裹丢弃,-管盖紧闭;
8、实验室自配试剂去离子水、缓冲液等和所有使用器具在使用之前均应高压灭菌或紫外杀菌,尖、反应管等实验耗材应-使用。
pcr实验室建设
-基因扩增检验实验室需要依据《机构-基因扩增检验实验室管理办法》、《实验室生物安全通用要求》、《生物安全实验室建筑技术规范》等相关规定进行规划建设。
1、二级生物安全实验室的装修
根据《人间的病原微生物名录》,pcr实验室所操作致病性生物因子大多属于第二类病原微生物,实验活动所需生物安全实验室级别的生物危害等级为bsl-2。列举装修要点如下:
1、实验室墙壁、顶板和地板应当光滑、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑,不得在实验室内铺设地毯和悬挂窗帘。实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好、所有阴角采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;墙体和吊顶建议使用彩钢板。
2、地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
3、灯具要选用净化灯具,能达到便于清洗、不积尘的特点。实验室应设应急照明装置,同时考虑合适的安装位置,以-人员安全离开实验室。
4、有-的电力供应和应急照明。每个房间必须装有紫外线杀菌灯,杀菌灯的安装高度在1.8~2.1m之间。
5、传递窗内部安装有紫外灯,供消毒用。
6、应配备足够的固定电源插座,避免多台设备使用共同的电源插座。应有-的接地系统,应在-安装漏电保护装置或监测报警装置。
7、实验室台(桌)柜和座椅等应稳固和坚固,边角应圆滑。实验台面应防水,并-受热、、酸碱、消毒剂及其他化学剂。一般采用环氧树脂台面。
8、实验台中的橱柜和实验台应牢固,实验台、柜和其他设备之间应保持一定距离,以便清洁。
9、实验室门为净化门,应有可视窗并带自动闭门器,实验室的门与门不能相对开启,必须错位开启。并达到适当的防火等级,门锁及门的开启方向应不妨碍室内人员逃生。
关于pcr实验室的一些经验
试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含-气溶胶的空气进入,造成污染;
可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。
-扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含-的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。
在理想情况下,pcr实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。
pcr实验室进风由原有中央空调控制,要求将中央空调风口安装到,且高度为地面铺装好后2600mm处。
如果使用荧光pcr仪,扩增室和产物分析室可以合并。
若房间进深允许,可设pcr内部走廊。需要-的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比走廊更有意义。
各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止-气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
净化工程的金字塔竞争格局
因为经济的不断进步,我们对于生活的要求也随之提升。净化工程企业作为有效提升服务的手段,净化工程也随之被广泛实行,众多净化公司开始“雨后春笋”般的出现。净化工程一项性、综合性、难度大的项目工程,这也对相关净化公司提出了更为的要求。
净化工程分为设计、施工、管理,3个阶段,它涵盖了空态、静态、动态,3个占有状态,且环境也受控,同时还与风险评估、生产的概念、程序相融合。加之洁净技术跨行业、跨、跨学科的特点,让其净化工程的难度、复杂程度都具有明显的增加。众多净化公司也开始形成了“金字塔”结构的市场竞争格局,端市场主要由内外企业掌控,大量内中小企业技术力量不够,主要承接净化度要求较低的工程。
在庞大的净化工程的设计、施工过程中,潜在问题有很多,未能受控的污染源等都会直接让整个洁净室的环境失控。而净化工程也是主要根据实际情况设置针对性的净化方案,从而-工程。
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