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河北反相色谱柱采购- 慧德易科技有限公司
液相色谱仪在基本原理上和气相色谱仪是一致的，所以设备的基础原理差不多，但是他们在检测方面是有不相同的地方的，有不相同的，但又有不同之处：液相色谱 与气相色谱的主要区别可归结于以下几点：
1、进样方式的不同：液相色谱仪只要将样品制成溶液，而气相色谱需加热气化或裂解；2、流动相的不同，在被测组分与流动相之间、流动相与固定相之间都存在着一定的相互作用力；
3、由于液体的粘度较气体大两个数量级，使被测组分在液体流动相中的扩散系数比在气体流动相中约小4~5个数量级；
4、由于流动相的化学成分可进行广泛选择，并可配置成二元或多元体系，满足梯度洗脱的需要，因而提高了液相色谱的分辨率柱效能；
5、液相色谱采用5~10lm细颗粒固定相，使流体相在色谱柱上渗透性大大缩小，流动阻力增大，必须借助高压泵输送流动相；
6、液相色谱仪是在液相中进行，对被测组分的检测，通常采用灵敏的湿法光度检测器，例如，紫外光度检测器、示差折光检测器 、荧光光度检测器等；
7、液相色谱与气相色谱相比较，液相色谱同样具有高灵敏度、能和高速度的特点。
8、液相色谱的定性和定量分析，与气相色谱分析相似，在定性分析中，采用保留值定性，或与其他定强的仪器分析 法连用；在定量分析中，采用测量峰面积的化法、内标法或外标法等，但液相色谱在分离复杂组分式样时，有些组分常不能出峰，因此化-量受到-，而内标-量则被广泛使用。
液相色谱柱由柱管、压帽、卡套密封环、筛板滤片、接头、螺丝封头与柱填料等组成。
柱管：多用不锈钢制成，若果使用时柱压不高于70kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有-的光洁度。用于柱填料的装填。空柱各组件均为不锈钢材质，-受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。
色谱柱由柱管、压帽、卡套密封环、筛板滤片、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70 kg/cm2 时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有-的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，孔径0.2~20μm5~10&μm，取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。
下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序，作为参考：硅胶柱以正已烷或-、和依次冲洗，然后再以相反顺序依次冲洗，所有溶剂都必须严格脱水。能洗去残留的强极性杂质，已烷使硅胶表面重新活化。反相柱以水、、、或依次冲洗，再以相反顺序依次冲洗。如果下一步分析用的流动相不含缓冲液，那么可以省略用水冲洗这一步。能洗去残留的非极性杂质，在冲洗时重复注射100~200μl-数次有助于除去强疏水性杂质。-与或的混合溶液能除去类脂。有时也注射二甲-数次。此外，用、和三0.1%梯度洗脱能除去蛋白质污染。
阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗，阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗，除去交换性能强的盐，然后用水、、除去吸附在固定相表面的有机物、、水依次冲洗。
保存色谱柱时应将柱内充满或，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。
在后两种情况发生时，小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度注意把被污染填料取净再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相与柱内相同填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到-，但是很难恢复到新柱的水平。
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