江西病原-效力-「世纪久海」

{微生物检测}微生物接种

将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。

接种和分离工具

1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀

常用的接种方法有以下几种：

1、划线接种

这是zui常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。

2、三点接种

在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。

3、穿刺接种

在保藏yanyang junzhong或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。3、穿刺接种在保藏yanyangjunzhong或研究微生物的动力时常采用此法。它的做法是：用接种针蘸取少量的junzhong，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某---具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。

穿刺接种的两种方法：垂直法和水平法

微生物限度检查

计数方法适用性试验

   1.供试液制备

   根据供试品的理化特性与生物学特性，采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时，应均匀加热，且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1 小时。

   常用的供试液制备方法如下。如果下列供试液制备方法经确认均不适用，应建立其他适宜的方法。

   1水溶性供试品 取供试品，用ph7.0无菌----蛋白胨缓冲液，或ph7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1：10供试液。若需要，调节供试液ph值至6～8。---时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。——微生物培养——指将微生物接种到培养基内，经一定条件使微生物生长繁殖。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。

   2水不溶性非油脂类供试品 取供试品，用ph7.0无菌----蛋白胨缓冲液，或ph7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基制备成1：10供试液。分散力较差的供试品，可在稀释液中加入表面活性剂如0.1%的聚山梨酯80，使供试品分散均匀。若需要，调节供试液ph值至6～8。穿刺法:用接种针沾取的微生物经穿刺而进入半固体深层培养基中。---时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。

   3油脂类供试品 取供试品，加入无菌十四烷酸---酯使溶解，或与zui少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无---性的无菌表面活性剂充分混匀。表面活性剂的温度一般不超过40℃特殊情况下，zui多不超过45℃，小心混合，若需要可在水浴中进行，然后加入预热的稀释液使成1：10供试液，保温，混合，并在zui短时间内形成乳状液。---时，用稀释液或含上述表面活性剂的稀释液进一步10倍系列稀释。有时为了更有效地分离某些yanyangjun，可以把所分离的样品接种于培养基上，然后再把培养皿放在完全密封的厌氧培养装置中。

结束判断

1供试品检出控制菌或其它致病菌时，按一次检出结果为准，不再复试。

2供试品的---数、霉菌和酵母菌数其中任何一项不符合该品种项下的规定，应从同一批样品中随机抽样，独立复试两次，以 3 次结果的平均值报告菌数。

3供试品的---数、霉菌和酵母数及控制菌三项检验结果均符合该品种项下的规定，判供试品符合规定；若其中任何一项不符合该品种项下的规定，判供试品不符合规定。

微生物限度检测方法主要包括3种。      

1.微生物计数法：该种检测方法用于能在有氧条件下生长的嗜温---和---的计数。本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合相应的微生物限度标准。检验项目分别为：需氧菌、霉菌及酵母菌计数。其中，需氧菌计数方法适用性试验：铜绿假单胞菌、金黄色、枯草芽孢。7-2013食品安全标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验gb4789。霉菌及酵母菌计数方法适用性试验：白色、黑曲霉。      

2.控制菌检查法：控制菌检查法系用于在规定的试验条件下，检査供试品中是否存在特定的微生物。分别为培养基适用性检查和控菌检查方法适用性试验。控制菌计数方法适用性试验：耐胆盐革兰阴性菌、大肠埃希氏菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄菌、梭菌、白色。6、液体接种从固体培养基---菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物---菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。      

3.方法学适用性试验：---的微生物计数方法应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。