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肺缺血再灌注损伤是由于机体组织或在缺血再灌注后导致肺组织迅速损伤。缺血再灌注可能发生在肺,也可能是下肢或腹主动脉等,导致肺泡上皮细胞和肺毛细胞血管内皮细胞受损。
究其原因可能与组织细胞---、氧自由基产生和促炎因子释放等病理生理反应有关。
结扎法制备肺缺血再灌注损伤模型常用,因其操作简单、成功率高、实用性强,是研究肺缺血再灌注损伤发病机制和---保护的关键。
制备肺缺血再灌注模型我们选用适龄的sd大鼠,通过结扎手术进行造模。
原位杂---及的步骤:玻片的准备和样品固定,细胞或组织的预渗透处理,靶dna变性dna原位杂交,探针制备,原位杂交过程,杂交后洗涤,探针显色检测。
玻片的准备和样品固定
对于染色体涂片,1:1的---/醚处理的载玻片已能符合要求。对于组织切片的原位杂交,为了在实验过程中不丢失组织样品,可使用多聚赖氨酸或铬矾明胶包被的载玻片。
样品的固定步骤是为了保持样品的原有形态学。样品固定是原位杂交中的步骤,从化学反应角度来看,固定剂的使用和选择对后续杂交的影响不会太大,因为---杂交的功能分子基团被-包裹在dna双螺旋结构中,而交联剂的使用对rna基本没有影响。对于染色体涂片,常使用/固定;石蜡包埋的组织切片用固定。冷冻切片可通过在4%的---中固定30min,或使用bouin固定剂。
除了上面说到的那种比较基础的造模以外,还有针对各种人类疑难病症的动物实验,用到的动物种类也是有所区别的,比如说小一些的实验小白鼠的主要作用是尝试各种物药的安全性方面的实验以及各种不同的生物制品检验方面
对于的造模来说,通常都是有一些常规的动物操作的,比如说像注射,灌胃以及取血实验等,像实验的小白鼠或者兔子还会进行一些腹部或者劲部的类操作,---是实验小白鼠还有移植相应的模型的相关手术操作,主要的目地就是为了---的研究各种的产生以及相关的方法。
肝纤维化动物模型化学性损伤法:
雄性wistar大鼠,体重130g左右,用腹腔内注射,次20mg/100g体重,从第二次起12mg/100g体重,每周注射2次,共8周。
评价:第3周,在肝小叶间中间带出现大片的肝细胞变性坏死和炎细胞浸润,炎细胞浸润、坏---数和程度超过猪模型。6周后出现纤维束,纤维晚于和少于猪模型。大鼠肝纤维组织中有i型胶原的mrna增多。
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