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猪细粒棘球绦虫粪抗原(EG)ELISA检测试剂盒

发布者:上海将来实业股份有限公司  时间:2017-5-27 115.61.221.*

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
 
  猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒使用说明书
 
  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒 试剂盒名称】
  猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒
  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒 试剂盒用途】
  定量猪血清、血浆及相关液体样本中细粒棘球绦虫粪抗原(eg)的含量
  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒检测原理】
  本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法elisa。将标准品、待测样本加入到预先包被细粒棘球绦虫粪抗原(eg)透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物a、b,底物tmb在辣根---化物酶hrp催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中细粒棘球绦虫粪抗原(eg)浓度呈正相关,450nm波长下测定od值,根据标准品和样品的od值,计算样本中细粒棘球绦虫粪抗原(eg)含量。
  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒 试剂盒组成】
  1 酶标包被板 12孔×8条 7 底物夜a 6ml
  2 标准品:200ng/ml 0.6ml 8 底物夜b 6ml
  3 20倍浓缩洗涤液 20ml 9 终止液 6ml
  4 标准品稀释液 6ml 10 说明书 1份
  5 样本稀释液 6ml 11 封板膜 1张
  6 酶标试剂 6ml 12 密封袋 1个
  备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml
 
  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒需要而未提供的试剂和器材】
  1、37℃恒温箱
  2、标准规格酶标仪
  3、精密移液器及---吸头
  4、蒸馏水
  5、---试管
  6、吸水纸
  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒操作步骤】
  1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
  2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
  3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μl;待测样本孔中先加入待测样本10μl,再加样本稀释液40μl即样本稀释5倍;空白对照孔不加。
  4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
  5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次也可用洗板机按说明书操作洗板。
  6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μl,空白对照孔不加。
  7、温育:重复4的操作。
  8、洗板:重复5的操作。
  9、显色:每孔先加入显色剂a 液50μl,再加入显色剂b液 50μl,37℃避光显色15min。
  10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μl,终止反应颜色由蓝色立转黄色。
  11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值od值。
  12、计算:根据标准品的浓度及对应的od值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的od值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒 样本要求】
  1、样本不能含---钠nan3,因为---钠nan3是辣根---化物酶hrp的---。
  2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
  3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。
  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒注意事项】
  1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
  2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
  3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
  4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。
  5、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果0.1-200ng/ml范围内,乘以总稀释倍数即为样本终浓度。
  6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。
  7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。
  8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。
  9、底物b对光敏感,避免长时间暴露于光下。
 
  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒操作程序总结】
  准备试剂,样品和标准品
 
  加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟
 
  洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟
 
  洗板4次,加入显色液a、b,37℃显色15分钟
 
  加入终止液
 
  15分钟之内读od值
 
  计算
 
  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒检测范围】
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  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒规格】
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  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒贮藏】
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  【猪细粒棘球绦虫粪抗原(eg)elisa检测试剂盒有效期】
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