环境条件
无菌环境：---和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活1体内，解1毒系统和免1疫系统可抵抗微生物或其他---的侵入，但细胞在体外培养的过程中，缺乏机体免1疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对---的解1毒能力。为---细胞能在体外环境中生长繁殖，必须要---无菌工作区域、---的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。
常见的微生物污染有支原体、---、---。支原体无致死毒性，可与细胞长期共存，对细胞有潜在影响，但体积小，不易鉴别，可借助于地衣红或hoechst33342染色来进行检测。---增殖快，在短时间内即可大量扩增，并产生毒1素杀1---。---的种类繁多，肉眼可见，漂浮于培养液面上，可呈丝状、管状或树枝状等。
细胞冻存
细胞密度达到80%～90%时，ips细胞相关，去培养基，10ml pbs清洗2次。加入3ml含0.25%edta的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。加入lmldmem完全培养基终止胰酶---，转移至15ml离心管。加入10ml pbs清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmx2min，弃上清液。
加入lml冻存液90%血1清，10%dmso，放入冻存盒内盒内有---1醇，以---温度降低的速度，立即放入一80℃冰箱内，过夜，第二天放入液氮中，可以保存至少两年，如不放人液氮，可以保存三个月。
冻存液的配制：70%的完全培养基+20%fbs+10%dmso.dmso要慢慢滴加，边滴边摇。
ips细胞与胚胎es形态相似、核型、端粒酶活性、体外分化潜能均相同，同时也能够表达相同的表面标志分子。es细胞和ips细胞具有相同的基因。不同的是，es细胞中的与细胞多能性有关的基因能够表达，如：oct4，sox2等。而已分化的体细胞中的这些基因不能表达。通过导入与多能性有关的外源基因来唤醒体细胞中的多能性基因，从而使体细胞从分化状态重编程为多能性ips细胞。
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