单核苷酸-友名生物

t4 rna连接酶

用途：用rna 3末端标记；rna和rna分子间连接；寡核苷酸的环化；trna修饰；5 race中寡核苷酸连接到cdna单链；在蛋白质特定位点引入非天然---酸。

来源：由大肠杆1菌表达，表达基因的来源为t4嗜菌体。

活性定义：37℃30分钟内，催化1 nmol 5-[p]-(a)12-18成为磷酸酶不能---的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。

活性检测条件：50mm tris-hcl(ph7.5)，10mm mgcl2，10mm dtt，1mm atp，10μm 5-[p]-(a)12-18(10μm in 5-termini)。

纯度：不含dna内切酶和外切酶，不含rna酶，不含磷1酸酯酶。

酶储存溶液：10mm tris-hcl(ph7.5)，1mm dtt，50mm kcl，0.1mm edta，50%(v/v)glycerol。

reaction buffer(10x)：500mm hepes-naoh(ph8.0 at 25℃)，100mm mgcl2，100mm dtt。

dna连接酶与dna聚合酶用途不同

dna连接酶主要用于基因工程，将由---性-内切酶“剪”出的粘性末端重新组合，故也称“基因针线”。如基因工程中，大肠杆1菌连接酶连接黏性末端，t4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端。

dna聚合酶在dna copy中起做用，主要是连接dna部分片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。