英文全称是 :in situ hybridization。原位杂交。指将特定标记的已知顺序---为探针与细胞或组织切片中---进行杂交,从而对特定---顺序进行定量定位的过程。
细胞特---mrna转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;组织中---dna/rna的检测和定位,如eb---mrna、人类状瘤---和巨细胞---dna的检测;癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;基因在染色体上的定位;检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些的诊断和生物学剂量测定等。
石蜡切片的fish要点
1组织固定,植物茎原位杂交技术服务,采用ph7.2的10%甲醛固定24h是比较适合的,ph很重要。较厚的组织块建议切开后再固定。这一点小编已经反复提过很多次了。---的固定是所有病理实验的前提。
2对于石蜡切片来说,采用蛋白酶k作为---液是---的选择。---条件20g/l蛋白酶k在50℃下---20min。胃蛋白酶是极易失活的,失活了就没法充分---,---过度又会使细胞核变模糊。综合来看,小编更蛋白酶k。
3石蜡切片的杂交温度一般都是37摄氏度。而杂交时间则需要摸索才能得到---时间。不过,一般的过夜孵育基本可以达到目的。
4fish实验中非特---着色是个难以避免的问题,我们能做的就是尽量减少背景。具体可作为的地方:充分严格漂洗、全程避免干片、探针浓度不宜太高、杂交温度要控制在37℃。
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