生长---之培养细胞、新鲜培养基、dmso、无菌塑料冷冻保存管(nalgene 5000-0020)、等速降温机
(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟--->;-20℃30分钟--->;-8o℃16~18小时(或隔夜)--->;液氮槽长期储存。-20℃不可超过1小时,cs50冻存袋多少钱,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量消失,cs250冻存袋多少钱,亦可跳过此步骤直接放入-8o℃冰箱中。
(2程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至-8o℃以下) -120℃,再放在液氮槽长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,起到了细胞保种的作用。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,200-074-401冻存袋多少钱,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。
利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。 细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或dmso,可使溶液冰点降低,加之在缓慢---条件下,冻存袋多少钱,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。 采用慢冻快融的方法能较好地---细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。
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