1.欲冷冻保存之细胞应在生长---且存活率高之状态，约为80~90%致密度。
冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质，200-074-400冻存袋多少钱，例如hybridoma应在冷冻保存---至二日测试是否有antibody
2.细胞在液氮中可长期冻存没有时间---，冻存袋多少钱，而不会影响细胞活力﹔在-70度可保存数月。注意冷冻保护剂之品质。
dmso应为试剂级等级，200-074-401冻存袋多少钱，无菌且无色是直接购买无菌产品，以5~10m1小体积分装，4℃避光保存，勿作多次解冻。
3.冻存细胞数量要足够。无论再怎么小心，细胞在冷冻和复苏过程中总会死掉一批的。所以，一开始冻存细胞的数量要足够。一般要达到5× 106 /毫升，一瓶不够两瓶凑。但是，这个不能一概而论。有些细胞，比如杂交瘤细胞，只需要1-3x 106 /毫升
适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。 细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%．15%的甘油或二---(dmso)，可使溶液冰点降低，cs50冻存袋多少钱，加之在缓慢---条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细胞损伤。
1. 配制含10%dmso或甘油、10～20%小牛血的冻存培养液；
2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用pbs清洗。
3. 去除pbs，加入适量胰蛋白酶覆盖培养皿表面把单层生长的细胞---下来；
4. 离心1000rpm，5min；
5. 去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的密度为5×106/ml～1×107/ml；
6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；
8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。
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