单核苷酸-武汉友名生物公司(图)

所有合成cdna条链的方法都要用依赖于rna的dna聚合酶(反转录酶)来催化反应，主要有两个关键因素，一个是mrna模板，另一个是反转录酶 。商品化反转录酶有从禽类成髓细胞瘤---纯化到的禽类成髓细胞---amv逆转录酶和从表达化的moloney鼠---反转录酶基因的大肠中分离到的鼠---mlv反转录酶。amv反转录酶包括2个具有若干种酶活性的多肽亚基，单核苷酸，这些活性包括依赖于rna的dna合成，依赖于dna的dna合成以及对dna-rna杂交体的rna部分进行内切降解rna酶h活性。mlv反转录酶只有单个多肽亚基，兼备依赖于rna和依赖于dna的dna合成活性，但降解dna—rna杂交体中的rna的能力较弱。且其热稳定性较amv反转录酶差。mlv反转录酶能合成较长的edna如大于2～3kb。amv反转录酶和mi。v反转录酶利用rna模板合成cdna时的适ph、适盐浓度和适温度各不相同．所以合成链时相应调整条件是非常重要的。