RAC1 KIT信息「武汉纽斯特」
1. vasp通过调节rab11依赖性tgf-β受体的质膜靶向来促进肝星状细胞的tgf-β活化
肝l病学第61卷,首1期,第361-374页,2015年1月
2. rab5活性调节glut4分类为---反应性和非---反应性内体室:---抵抗发展的潜在机制。
内分l泌学。 2014年9月; 1559:3315-28
将裂解液转移到适当大小的试管中,并置于冰上。
如果发生核裂解,则细胞裂解液可能变得非常粘稠,难以移液。 如果发生这种情况,可将裂解液通过27?号注射l器针头3-4次以剪切基因组dna。
通过离心10分钟在4°c下为12,000 x g清除裂解物。
收集上清液并将样品保存在冰上以备立即使用,或速冻并保存在-70°c以便将来使用。
试剂制备
1x assay/lysis buffer:实验前用去离子水将5x的assay/lysis缓冲液稀释成1x的缓冲液,并在使用前加入蛋白酶抑制l剂如1 mm pmsf, 10 μg/ml leupeptin亮肽素,或 10 μg/ml aprotinin抑肽酶。
样品处理
贴壁细胞
1. 培养细胞密度达到大约80%-90%之间直径10 cm培养皿,~107个细胞,并用活性剂或抑制l剂进行处理。
2. 吸去培养基并用冰冷的pbs洗涤两次。
3. 向细胞中加入1x assay/lysis缓冲液每个直径10cm的组织培养皿中加入0.5-1ml。
4. 将培养皿放置于冰上处理10-20分钟。
5. 用细胞刮棒把细胞从培养皿下分离下来。
6. 将细胞裂解物转入合适的管中并放置于冰上。
7. 如果核发生裂解,细胞裂解物可能会变得非常的粘稠并且难以吸取。当这种情况出现时,将细胞裂解物用27?的注射l器针头来回吸取3-4次,以破坏基因组dna,从而避免上述情况的出现。
8. 4°c 12000 g, 离心10 min。
9. 收集上清~1-2 mg总蛋白并放置于冰上使用。如果样品不立即使用,请将处理后的样品存放于-70°c条件下。
gtpases的rab家族调节真核水泡膜运输。 rab35与两个血浆
膜和内体定位,并涉及到包括t细胞受体回收,卵母细胞卵黄蛋白回收和胞质分裂在内的各种过程。 rab35调节神经元样细胞中的神经突生长,并可以-突起。
当前没有直接测定法来测量rab35 gtpases的活化。
neweast biosciences rab35激l活检测试剂盒基于特定于配置的单克l隆
特---识别rab35 gtp而不识别rab rab35 gdp的抗l体。鉴于...的高度亲和力
抗原的单克l隆抗l体,可以在短时间内进行激l活测定。这个
分析提供了---的结果,并具有一致的可重复性。
这些抗rab35 gtp单克l隆抗l体也可以用于监测大鼠rab35的激l活。
1细胞和组织中的免l疫组织化学。
neweast biosciences rab35激l活检测试剂盒提供了一种简单快速的方法来监测
rab35的激l活。每个试剂盒均提供足够的量以执行20个测定。
gα13活化试验。mef细胞分别用lpa第2道或不加lpa1道处理。细胞裂解物
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