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在20℃时虽然微流控芯片上的结晶条件数少于24孔结晶板(67 vs 94),但主要是嗜热菌蛋白酶的结晶条件数---减少,其他4种蛋白在两种方法上均有相近的结晶条件数,表明微流控芯片能以接近24孔结晶板的效率进行蛋白质结晶筛选.但是,在4℃时微流控芯片与24孔结晶板有60%的结晶条件不同,20℃时有90%的结晶条件不同,这表明目前的这种微流控芯片还不能直接代替传统的24孔结晶板,它可以作为蛋白质结晶筛选时的一种补充方式。
设计并制作了一种在微腔中对蛋白质进行微批量法(microb---h)结晶的碟式微流控结晶芯片,它是一种高通量、低成本、低耗样量(纳升级)、操作简便的蛋白质结晶筛选方法,这种芯片能成功地结晶溶菌酶(lysozyme)和青色荧光蛋白(cypet).为了系统地比较这种微流控芯片与传统的使用蒸汽扩散法的24孔结晶板的结晶能力,用3个hampton结晶试剂盒,在4℃及20℃培养条件下分别对5种标准蛋白(溶菌酶(lysozyme)、木聚糖酶(xylanase)、脂肪酶b(lipase b)、---异构酶(glucose isomerase)和嗜热菌蛋白酶(thermolysin))进行了结晶筛选实验.结果表明,在4℃时微流控芯片与24孔结晶板有相近数目的结晶条件(91 vs 98)。
研究蛋白质晶体结构的物理化学分支学科。蛋白质分子是由上百或更多的α----酸作为单体缩合而成的多肽见肽链构成的。能构成蛋白质中多肽链的α----酸总共有 20种l－---酸。通过它们不同的组合和排列形成---酸顺序不同的多肽链，然后这些多肽链进一步通过交联构成千万种蛋白质分子。多肽链的---酸顺序及其交联的位置代表蛋白质分子的一级结构。在一级结构的基础上，蛋白质分子中的多肽链按一定的方式在空间分布，形成二级和三级立体结构等。－---酸、 多肽链和二硫桥蛋白质分子是一个由α----酸单体相互缩合而成的多肽分子。其中每个---酸缩合后残留的部分称为---酸残基。
概括了蛋白质结晶的基本过程,阐述了蛋白质结晶的早期发展历程,重点介绍了蛋白质结晶的近期研究状况,主要包括:形核机理的研究,结晶条件的筛选和结晶技术的优化以及基于结构的设计技术.---是对离子液体在蛋白质结晶过程中的应用及发展前景进行了讨论，
论述了---生物大分子(蛋白质,酶等)沉淀结晶的研究现状和进展,着重从结晶热力学,粒子---,结晶的成核与晶体生长,以及场的作用等方面阐述了蛋白质沉淀结晶过程的特定现象与可能的结晶机理,对蛋白质的沉淀结晶过程作了的描述,并提出未来研究方向,为蛋白质结构分析,新药设计,生化研究以及工业化生产提供一定的基础。
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