实验室微生物检测的行业须知「世纪久海」

{微生物检测}微生物分离纯化

4、富集培养法

富集培养法的方法和原理非常简单。我们可以创造一些条件只让所需的微生物生长，在这些条件下，所需要的微生物能有效地与其他微生物进行竞争，在生长能力方面远---过其他微生物。如果要分离一些专性寄生菌，就必须把样品接种到相应敏感宿主细胞群体中，使其大量生长。包括生产型食品微生物(---，酵母菌等)和是食物变质(霉菌，---等)和食源病原微生物(大肠菌，肉毒菌等)。通过多次重复移种便可以得到纯的寄生菌。

5、厌氧法

在实验室中，为了分离某些yanyangjun，可以利用装有原培养基的试管作为培养容器，把这支试管放在沸水0浴中加热数分钟，以便逐出培养基中的溶解氧。然后快速冷却，并进行接种。接种后，加入无菌的石蜡于培养基表面，使培养基与空气隔绝。另一种方法是，在接种后，利用n2或co2取代培养基中的气体，然后在火焰上把试管口密封。食品安全---历史证明，随着社会发展，---不断完善，在解决或基本解决食品添加剂的添加之后，食源病原微生物引发的食品安全问题就---。有时为了更有效地分离某些yanyangjun，可以把所分离的样品接种于培养基上，然后再把培养皿放在完全密封的厌氧培养装置中。

6、单细胞(或单孢子)分离法

是采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。较大的微生物，可采用毛细管提取单个个体。个体相对较小的微生物，需采用显微操作仪，在显微镜下用毛细管或显微zhen、钩、环等挑取单个微生物细胞或孢子以获得纯培养。接种、培养是食品微生物应用、研究过程中基本和必不可少的方法。单细胞分离法对操作技术有比较高的要求。

---效力

适用性检查 取大肠埃希菌、金黄色球菌、铜绿假单胞菌各50～100cfu,分别注入无菌平皿中，立即倾注胰酪胨大豆琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置30～35℃培养48小时，计数；取白色nian珠菌、黑曲霉各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏---琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置20～25℃培养72小时，计数；单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落，取单个菌落制成悬液，重复上述步骤数次，便可得到纯培养物。同时，用对应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。

   3.抗jun活性的去除或灭活

   供试液接种后，按下列“微生物回收” 规定的方法进行微生物计数。若试验组菌落数减去供试品对照组菌落数的值小于菌液对照组菌落数值的50%，可采用下述方法消除供试品的---活性。

   1增加稀释液或培养基体积。

   2加入适宜的中和剂或灭活剂。

   中和剂或灭活剂表2可用于消除干扰物的---活性，zui好在稀释液或培养基灭菌前加入。若使用中和剂或灭活剂，试验中应设中和剂或灭活剂对照组，即取相应量稀释液替代供试品同试验组操作，以确认其有效性和对微生物---性。中和剂或灭活剂对照组的菌落数与菌液对照组的菌落数的比值应在0.5～2 范围内。3、v-p试验某些---在---蛋白胨水培养基中能分解---产生---，---缩合，脱羧成---，后者在强碱环境下，被空气中氧氧化为二---，二---与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称v－p(+)反应。

   3采用薄膜过滤法。

   4上述几种方法的联合使用。

   若没有适宜消除供试品---活性的方法，对特定试验菌回收的失败，表明供试品对该试验菌具有较强抗jun活性，同时也表明供试品不易被该类微生物污染。但是，供试品也可能仅对特定试验菌株具有抑制作用，而对其他菌株没有抑制作用。因此，根据供试品须符合的微生物限度标准和菌数报告规则，在不影响检验结果判断的前提下，应采用能使微生物生长的更高稀释级的供试液进行计数方法适用性试验。食源病原微生物可通过接触物表面、水、土壤、空气、排泄物、食物等媒介传播，从而污染“从农田到餐桌”的食物链任何环节。若方法适用性试验符合要求，应以该稀释级供试液作为zui低稀释级的供试液进行供试品检查。