辽宁酶联ELISA试剂盒报价服务为先 北京中检维康有限公司
包括以下步骤:
1)抗原表位的计算机筛选;
2)抗原的制备;
3)采集;
4)间接elisa方法的建立;
5)间接elisa方法的敏感性和特-验证;
6)试剂盒的稳定性验证;
7)对屠宰场进行-检测。该方法简单、快速、灵敏度高、特-强、稳定性合格、重复性好。应用本发明制得的试剂盒能有效检出戊型-,适用于大批量发病样本的检测,可用于猪戊肝的快速诊断,并预防、控制猪戊-的流行和阻断戊-由猪向人传播。
1.包被:用0.05mph9.牰碳酸盐包被缓冲液将稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。简称洗涤,下同。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。同时-白孔,阴性对照孔及阳性对照孔。
3. 加酶标:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标经滴定后的稀释度0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的tmb底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2m-0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测od值:在elisa检测仪上,于450nm若以abts显色,则410nm处,以空白对照孔调零后测各孔od值,若大于规定的阴性对照od值的2.1倍,即为阳性。
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1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品未知0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.同时-白、阴性及阳性孔对照于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;
6.然后用ddw洗涤。
其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
elisa试剂盒是否灭活:加热可灭清中补体系统,在较少数情况下培养es细胞,-细胞时建议灭活,在培养其余细胞时不建议灭清。灭活非常容易产生沉淀,如必须灭活请按56℃,30 min,轻微摇晃原则操作,灭活温度高、时间长、摇晃不均都容易产生沉淀。
elisa试剂盒培养基:无培养基在结果重复性、细胞体外分化方面有优势,但是,仍然是培养液中基本的添加物,尤其是在原代培养或细胞生长状态-时,常常会先使用有的培养液进行培养,待细胞生长旺盛后再换成培养液。
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