PROTEIN A亲和捕获择优「纳微科技」

用于传统小分子的分离方法如重结晶、精馏等对生物分子具有破坏性，因此基本上不能用于生物大分子分离纯化，使得生物大分子的分离面临-挑战。层析技术具有-的分离纯化效率，且条件温和，在分离纯化过程中容易保持生物分子的活性，因此层析技术已成为生物分离的主要的工具。层析分离过程是把混合样品从装有层析柱的一端进去，由于不同生物分子其尺寸、电荷、疏水等物理性能有差异，使得其与层析柱填充的介质作用力或吸附强度不同，导致不同分子在层析柱保留时间不同，因此不同组分的分子可以按顺序从柱子另外一端流出来以达到分离的目的。层析分离效果主要取决于其层析柱中的层析介质微球。由于层析分离纯化技术牵涉到材料、生物、化学等交叉技术领域，因此层析介质制备技术门槛高，用于生物分离的层析介质中国基本依赖进口。

层析介质粒径大小及均匀性对生物分离的影响

层析介质粒径大小和分布是影响其分离性能很重要的参数之一。粒径越小，分布越均匀，柱效越高，分辨率越高。因此制备精l确的粒径大小及高度的粒径均一性的单分散层析介质一直是业界追求的目标。纳微成功开发出单分散大孔聚合物层析介质可以用于分离生物大分子。纳微单分散层析介质的研发成功不仅填补国内这一领域的空白，也为单分散层析介质的发展做出贡献。

以纯化溶瘤-为例，由于其在生产过程中存在宿主蛋白等杂质，纯化前 sec测试纯度为6.5%。纯化采用两种基质相同的介质，其表面化学功能也很一致，主要区别是前者是无孔实心的层析介质，而后者是传统的多孔层析介质。层析纯化的方法是阴离子交换吸附然后梯度洗脱bind-elute模式。从层析图谱可以看出，在洗脱及cip过程中无孔介质洗脱杂质更小，峰值-，意味着上样过程中结合的杂质会更少，有利于表面结合的-分子纯化。通过对层析洗脱液sec纯度分析比较，发现用传统的多孔层析介质实验得到的-样品纯度为54%图 ，而用无孔的同类型介质实验得到的-纯度达到接近90%图 。

与上游十多倍生产效率提升相比，下游分离纯化技术进步明显滞后，导致下游工序成为生产瓶颈，抗l体主要生产成本也转移到下游。下游工艺在整个生物制药生产中占据60%以上生产成本，也被认为是需要改进的技术领域。下游工艺-性决定了-的，及-生产效率和成本，也成为生物制药企业的-竞争力所在。生物制药下游生产工艺目的就是把目标药l物分子从复杂发酵液体系中分离出来以满足-纯度及的需求。一方面-部门对生物药的纯度和要求越来越高，另一方面生物分子具有结构复杂，且对外部条件敏感，稳定性差，杂质多，浓度低等特点，使得生物药分离纯化的挑战。比如说治l疗用抗l体不仅对含量有严格的要求，还必须去除各种潜在的杂质如宿主hcp, dna，endotoxin, 抗l体-体及降解片段等表2。