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在各种致病因素作用下,大脑实质受到损伤后可出现神经功能改变,如偏瘫、平衡失调等。
对于神经系统---动物模型而言,造模结束只是步,验证个体模型是否成功是第二步,而控制组内个体特征一致性是第三步。
采用神经功能评分是重要的观察指标,可以用来在体评价模型是否成功或者病变---程度。尽量控制动物模型的评分一致性是很困难但不得不做的一件事。
这里介绍三种常见的啮齿类神经功能评分方法。
一、【longa评分法】
无神经功能缺陷:0分;
瘫痪侧前爪不能完全伸展:1分;
行走时向瘫痪侧转圈:2分;
行走时向瘫痪侧倾倒:3分;
不能自动行走,存在意识丧失现象:4分。
二、【bederson评分法】
抓起动物的尾巴,使动物离台面10cm高。此时,正常大鼠的前爪处于伸直状态,而存在神经功能病变的动物则可出现如下表现:
动物尾巴提起后,瘫痪侧前肢回收并屈于腹下,而正常侧肢体伸向台面:1分;
除第二条表现以外,俯卧于台面时向瘫痪侧侧推动物的阻力较正常侧明显降低:2分;
除条和第二条以外,动物行走时向瘫痪侧旋转:3分。
三、【平衡木评分法】
一根长为80cm、宽为2.5cm的木条,水平固定在离台面10cm高度的地方,然后让动物在木条上行走。
能跳上平衡木条,可以自由行走但不跌倒:0分;
能跳上平衡木条,动物在上面行走会跌下,但跌下的机会小于50%:1分;
能跳上平衡木条,动物在上面行走会跌下,但跌下的机会大于50%:2分;
动物在正常侧身体的帮助下可以跳上平衡木条;但是瘫痪侧的后肢不能够帮助身体向前移动:3分;
动物无法在平衡木条上行走,但是可以坐在木条上:4分;
将动物放在木条上,动物很快会掉落下来:5分。
五、注意事项
1. 小宫设备和实验程序与大鼠类似,但迷宫规格应比大宫小,以免增加小鼠行为操作难度。
2. 本实验也可只用来测定工作记忆。方法中不同的是,在所有臂均放置食粒,而不是只选4个臂放置食粒。
3. 慢性应激对动物的迷宫操作可产生影响,且存在性别差异。经过慢性应激以后,雄性大鼠---减弱,表现为记忆错误频率增加;雄性大鼠的空间记忆反而增强,表现为错误频率减少。
4. 即使在---进食条件下,也应让大鼠体重每周增加5g,以免动物因营养---而患病。剔除身体状态---的动物。
5. 迷宫周围的任何一件物品均可被动物用来作为空间定为的标志。去除或移动这些标志可能使动物操作困难并降低迷宫臂选择的准确性。
动物睡眠剥夺模型,睡眠剥夺是研究睡眠的功能与发生机制的重要方法。睡眠剥夺模型的选择将直接影响睡眠剥夺实验的---性及准确性对睡眠剥夺实验结果具有重要的影响。现将几种常用的睡眠剥夺模型的方法评价及进展情况综述如下。
1.平台睡眠剥夺技术
此类方法主要是利用大鼠畏水及在水中无法进入睡眠的生活习性,通过在盛水的水槽中放置平台,让大鼠站立在平台上,因平台直径足够小(直径 6.5 cm 或更小)当大鼠进入 rem 时,因全身肌张力降低引起节律性低头触水以此来达到剥夺 rem 的目的, 此类方法简单易行无需复杂昂贵的设备,在不同条件的实验室均能开展因而应用广泛 其主要用来剥夺大鼠的rem ,可分为以下三种方法:
1.1单平台睡眠剥夺法
此方法早于 1964 年被应用在猫的睡眠剥夺实验中,不久以后有人将此方法应用于大鼠的睡眠剥夺实验,,方法为将一圆柱形台 (直径约 65 m m )放置在长 400 mm宽340 m m高160 mm的水槽中,往水槽中加水至平台露出水面约 10 mm ,将 1 只大鼠置于台上,大鼠可在平台上站立,可进入 nrem,当大鼠进入 rem 时全身骨骼肌张力明显降低,颈部肌张力降低引起节律性低头触水从而无法进入 rem,采用 sp 实验可引起动物的体重及胸腺重量减轻,上腺重量增加,血浆中上腺皮质酮增加,动物攻击行为增加,机体反应抑制等。
2.2旋转圆筒睡眠剥夺法
此方法于 1979 年先应用于睡眠剥夺实验中,设备主要由一柱形圆筒及一小型慢速马达构成。圆筒直径 30 cm,高 30 cm 。圆筒底由 pvc (聚)构成,侧壁由直径为 10.4 m m 的 pvc 杆围成。杆长度 30 cm,杆之间间隔 15.5 m m,圆筒与小型马达相连。马达转速为每 45 s转 1 圈(也有学者应用每 m in 转 1 圈)。至少在实验前 2 d每天将大鼠放入圆筒中适应环境 1 次,适应时间不少于 3 h。实验时将马达按 45 s每1 圈进行匀速转动,通过圆筒的转动带动大鼠---运动而达到睡眠剥夺的目的。此类方法简单易行,睡眠剥夺效果明显。缺点是长时间---运动可引起机体的运动后应激反应及---劳,可能干扰睡眠剥夺实验结果! 此类方法发展出多种变化,有实验者在进行新生大鼠睡眠剥夺时将筒旋转速调节至 2~3 r/m in后期逐渐增加至 6~7 r/m in。
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