人环磷酸腺苷 CAMP ELISA服务为先 武汉纽斯特
结果计算
样品中camp浓度有多种计算方法。x轴表示camp标准品浓度,y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。
1 样品和标准品的净光密度(od)平均值的计算:
净od平均值 = od平均值 - nsb孔od平均值
2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(b0孔)的百分比,计算公式 如下:
百分比值 = (净od平均值/ b0孔od平均值)×100
3 绘制净od平均值或百分比值对camp标准品浓度的logit-log曲线。通过插值即可得到样品中camp浓度。
因此为筛选出腺苷酸环化酶的激l活剂或磷酸二酯酶的抑制l剂,需要一个高敏感度、特---的、可重复的方案用于检测c---的含量。考虑到大分子的化合物可能存在较弱的影响,这一个初筛是有---的。
目前商业化提供的一些c---检测试剂盒主要使用的是非亲和纯化的c---多克l隆抗l体。尽管据称有特---,但这些多克l隆抗c---抗l体与camp和gtp呈现一定程度的交叉反应。且在大多数细胞类型中,c---含量低于camp 100倍。
武汉纽斯特生物科技有限公司wuhanneweastbiotechonologyco.ltd,系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国neweastbio---于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等。
做好对照
正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以---实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特---反应,可采用羊血l清、兔血l清或bsa等封闭。
洗液不够时,可用蒸馏水自行配制ph7.4,0.02m的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的---钠后可长期保存。
底物是光敏感的,要在临用前现配。
检测前,要打开酶l标仪,使之稳定10分钟以上。
底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
待检样品要澄清,否则会影响结果。
温浴时间应遵守试剂盒规定。
应尽量做双孔实验,这样才能---数据的准确性。
对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
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