HRP-兔抗马IGG(H+L)来电垂询 博特龙技术有限公司
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实验步骤:
1、弃去板内液体,洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。再在每个标本的6孔中分别加入6种酶标二抗各100μl,通用阳性、阴性对照的各孔也一样。在加样图上或酶标板上做好标记。贴上封板膜37℃温育30分钟。
2 、吸弃板内液体,洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。每孔分别加入显色剂 a 和显色剂 b 各50μl,换一张新的封板膜贴板避光37℃显色20分钟。
3 、elisa试剂盒特---好一般肉眼即---察出结果,看显色蓝的那个孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 ig 类或亚类。更可将反应终止液每孔50μl终止反应后用酶0标仪450nm 测长,630nm 参考波长双波长测定结果,参看高值孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 ig 类或亚类(阳性对照 od 一般不小于0.8,阴性对照一般不高于0.15,阳性判定标准:样品 od 大于阴性 od+0.15,阴性 od 低于0.05按0.05算)。
博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、---包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和hrp、biotin、fitc、au、pe、dylight、alexa fluor、cy3、cy5、 amca、tritc、texa red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有wb、ihc、elisa、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
1、一次没用完的板子要带干燥剂放自封袋封好,随盒存放。
2、拿放板子时不要剧烈抖动,以免孔间交叉污染出现错误结果。
3、本试剂一般不会出现两个阳性,但出现两个阳性的现象不论在进口或国产试剂中都是真实存在的,一般会一个 od ---,另一个很低但却还能判为阳性,实验分析表明这种情况下以 od 高值孔为准,出现这种情况有多重原因:
(1)培养的细胞中有饲养细胞残留,
(2)抗0体本身存在变异,
(3)样品为非特异亲和纯化的抗0体或样品是腹0水,
(4)上清出现少量污染,
(5)实验操作粗放,
(6)加错试剂。
4、通用阳性对照数据并不一定完全一样,仅作为试剂有效指示。
博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、---包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和hrp、biotin、fitc、au、pe、dylight、alexa fluor、cy3、cy5、 amca、tritc、texa red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有wb、ihc、elisa、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
水佐剂是一种用于制备小鼠单克0隆抗0体和多克0隆抗0体的免0疫佐剂,与常规使用的弗氏佐剂相比,具有免0疫针次少、抗原用量低、抗0体产生快、抗0体滴度高、抗0体亲合力高、不破坏抗原天然构象和使用方便等优点。
水佐剂使用重要提示
1、水佐剂只需两针免0疫,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,与弗氏佐剂相比可至少减少两针次免0疫。
2、水佐剂通过减少免0疫针次和降低每针次抗原用量,从而可---节省总抗原用量。使用的抗原用量为
1免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg通常为10~20μg;
2免0疫原性较强的灭活全---和---样颗粒每针次0.1~10μg通常为1~2μg。
3、水佐剂抗0体产生快,抗0体滴度高,抗0体亲合力高,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,只需要在三周内进行两针免0疫,通常在第五周即可获得elisa滴度高1:10000~1:10000000的高亲合力抗0体水平。
人们抽取动物的---,分离出含抗0体的。这种体内生产抗0体的传统方法有许多缺点。例如所获得的抗0体不纯,不能连续生产,动物饲养与管理工作繁重等,故长期以来医学家们一直在探索在试管内即体外生产抗0体的方法, 1976年英国剑桥大学两位科学家milstein和koh1er将小鼠瘤细胞与小鼠的脾细胞杂交。小鼠瘤细胞能在体外增殖传代并能分泌无抗0体活性的球蛋白;小鼠脾细胞能产生针对某种抗原的抗0体,但不能在体外增殖。将两者融合成一种杂交瘤细胞,后者继承了两个亲代细胞的特点,既可在体外增殖,又可产生针对某种抗原的抗休。一个杂交瘤细胞在体外不断增殖所形成的细胞集团,被称之为。
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