HRP-小鼠抗大鼠IGG FC来电垂询「博特龙」
一、服务内容
1、从动物细胞、人或动物组织、---、植物等样品中提取蛋白,重组蛋白、血0清、培养上清等样品
2、对样品中蛋白进行半定量分析
3、western blot检测
1 电泳:聚丙0烯---凝胶sds-page分离蛋白样品
2 湿法转印bloting:tank transfer
3 杂交:用抗0体鉴定膜上的特定蛋白incubation: antibody
4 化学发光检测ecl,胶片---,totallab quant软件读取iod值可选
博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、---包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和hrp、biotin、fitc、au、pe、dylight、alexa fluor、cy3、cy5、 amca、tritc、texa red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有wb、ihc、elisa、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
水佐剂是一种用于制备小鼠单克0隆抗0体和多克0隆抗0体的免0疫佐剂,与常规使用的弗氏佐剂相比,具有免0疫针次少、抗原用量低、抗0体产生快、抗0体滴度高、抗0体亲合力高、不破坏抗原天然构象和使用方便等优点。
水佐剂使用重要提示
1、水佐剂只需两针免0疫,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,与弗氏佐剂相比可至少减少两针次免0疫。
2、水佐剂通过减少免0疫针次和降低每针次抗原用量,从而可---节省总抗原用量。使用的抗原用量为
1免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg通常为10~20μg;
2免0疫原性较强的灭活全---和---样颗粒每针次0.1~10μg通常为1~2μg。
3、水佐剂抗0体产生快,抗0体滴度高,抗0体亲合力高,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,只需要在三周内进行两针免0疫,通常在第五周即可获得elisa滴度高1:10000~1:10000000的高亲合力抗0体水平。
水佐剂免0疫步骤
步骤一:用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注:使用的抗原用量为1免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg通常为10~20μg;2免0疫原性较强的灭活全---和---样颗粒每针次0.1~10μg通常为1~2μg。
步骤二:充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。
步骤三:通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠,每只小鼠100μl。备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。
步骤四:第21天按同样方式加强免0疫一针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。
步骤五、第35天采微量尾血进行elisa测定,抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内, 随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注:若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求,可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。
在---、和组织液里的抗0体主要是igm和igg。在正常血浆中,igm约占血浆内总抗0体量的10%。igm的杀菌、溶菌、促进吞噬作用及凝集抗原的作用都比igg强,它也能中和---外和阻止---。人若缺乏igm,可能引起致死性的。igg占血浆内抗0体总量的70%~0%,由于它的分子量较小,通透性大,所以在体内分布。它能进入组织液和脑脊液内;并能通过进入胎儿体内。iga具有明显的和抗---作用,分泌型的iga存在外分泌物中,如初乳、泪液、唾液、胆汁以及---道、呼吸道和尿、生殖道的粘膜分泌液中。而且,---中的,iga也能在里形成大量分泌型iga,由胆汁排人十二指肠,构成外界物质通向体内的道防线,阻止上述管腔内的抗原物质在管壁附着。因此,iga是抗粘膜的一个重要抗0体,使整个内脏的功能都能得到增强。
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