CAMP ELISAKIT来电洽谈「武汉纽斯特」

目前商业化提供的一些camp检测试剂盒主要应用elisa的方案，使用的是非亲和纯化的camp多克l隆抗l体，尽管具有灵敏性，这些多克l隆抗l体与atp存在一定程度的交叉反应。基于atp是camp生产的底物，很有-找到一种能高特-识别camp的抗l体。

纽斯特生物开发出了鼠单克l隆抗l体的camp elisa 检测试剂盒。该单克l隆抗l体对camp的特-比camp、atp等类似的小分子高出108 倍以上。相较于其他的多克l隆抗l体camp试剂盒，纽斯特生物camp elisa试剂盒能-的提高其灵敏性和特-，且能有效避免来自动物多克l隆抗l体的批次间差异， 因此可以提供长久有效地可重复性定量检测。

对于生长的组织培养液中的细胞，首先移除培养基，然后加入0.1m hcl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解；如果裂解不充分，接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心，收集上清直接用于实验。临用前在0.1m hcl中加入0.1%至1%浓度的triton-x 100可增强细胞和组织裂解。在这个浓度范围内，去污剂并不干扰试验的结合部位，但是会适度的增加光密度值。含有triton的样品需利用标准曲线估计浓度，为了较精l确的测定，标准曲线需以相同方式稀释。取1 ml细胞培养上清加入10μl浓-，600g离心力于室温离心，上清液直接用于实验测定分析。

试剂准备

1. 非-化camp标准品

将5000 pmol/ml camp标准品溶液平衡至室温。从#1至#6标记六只洁净试管。移取475μl 0.1m hcl到#1号试管，400μl到#2至#6号试管。加入25μl 5000 pmol/ml camp标准品到#1管中，剧烈涡旋震荡。从#1管中取出100μl溶液至#2管中，涡旋震荡。以此类推，重复上步操作，梯度稀释至#6管。

经以上操作，#1至#6管中camp标准品浓度分别为250,50，10,2,0.4和0.08 pmol/ml详见camp实验稀释详情键盘纸。稀释过的标准品需在30分钟内使用。

标记一只试管作为无标准品空白对照nsb。移取600μl 0.1m hcl到nsb管中。

2. 洗涤液

将15 ml 10×洗涤液储液加到135 ml去离子水中，稀释成工作液。稀释液可在室温保存至试剂盒有效期限，或者3个月。