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洁净度

洁净室(1～4号)内***015μm尘埃检测结果表明:工作台面(层流罩下面)均<315个/l,达到100级洁净度,室内环境为<35个/l,达到1000级洁净度,。2、样品准备和rna-pcrrna-pcr的额外步骤需要额外的样品操作，这样增加了样品之间污染的机会。缓冲室ⅰ***015μm尘埃为202个/l,缓冲室ⅱ为154个/l,均小于350个/l的10000级洁净标准。

2、静压差　

洁净室ⅰ对缓冲室ⅱ为18103pa,洁净室ⅱ对安全通道为25168pa,洁净室ⅲ和ⅳ对缓冲室ⅰ为-2135pa,换鞋和更衣对洁净室处为5pa。

3、室内沉降菌　洁净室1～4号的工作台面按14只/m2检测沉降菌,平均为0115～c0125cfu/皿30min之间。室内环境平均为1～2cfu/皿30min之间;缓冲间平均为7cfu/皿30min,更衣间平均为21cfu/皿30min。

4、噪音、温度　洁净室内噪音均在55db以下。当调节温度开机后,洁净室ⅰ和ⅱ均在30min内达到调节温度,洁净室ⅲ和ⅳ及缓冲间、更衣室均在45min内达到调节温度。

2、样品准备和rna-pcr rna-pcr的额外步骤需要额外的样品操作，这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题，反转录一步可以在样品准备区进行。在rna-pcr中应用ung以防止污染的方法也有---。

3、建立前pcr区。

该去专门用于准备各种反应，这个区域必须保持干净，而且没有来自克1隆和样品准备的污染。前pcr区必须要有试剂和准备，---是专门用于前pcr区的正压活塞式移液管。

4、pcr实验室试剂的操作。

⑴所用的所有溶液都应该没有---和(或)---酶(dnase和rnase)污染。⑵所有pcr试剂中使用的水都应该是高的-新鲜蒸馏的去离子水，用0.22μm过滤的，并且是高压灭菌。通过无尘车间可以对室内范围中的微粒子和有害空气以及---等很多污染物进行排除，从而让室内的温度和洁净度得到了---。⑶在20℃到25℃贮存的试剂建议加点像---钠一类的抗微生物剂，在扩增试剂或样品制备试剂中加入0.025%的---钠不抑制扩增反应。⑷所用试剂都应该以大体积配制，实验一下看试剂是否满意，然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。⑸所有试剂和样品准备过程中都要使用---灭菌的瓶子和管子。⑹新配制的试剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。⑺样品准备和前pcr区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。