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多肽的分离制备,如何上量？如何增大分离度?

反相hplc应当是---的分离小肽方法，用ch3cn或ch3oh：h2o95：5做流动相，看保留如何，若无保留，建议改用其他色谱方法进行分离。

关于多肽的分离，首先要知道它的分子量大小，然后选择不同类型的填料，如孔径的大小。我们先在分析柱4.6mm内径上做一下实验,找到很大的分离度,这一过程的难度是很大的,要不断地改变流动相和固定相,然后再线性或非线性放大到制备,放大的倍数按分析柱的实验结果。分离后可以通过冷冻干燥得到固体。

还可以考虑离子交换来分l离。

制备色谱柱如何测柱效？

可以选择几种物质，---，萘、蒽等的衍生物上柱，流动相一般用65-80%的---/水，测定后根据保留时间计算塔板数。由于制备色谱的管路死体积一般比较大，很难得到和供应商相同的柱效。建议在制备柱开始使用时在自己的色谱上测一下柱效，然后定期检测柱效进行以进行比较。

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工业制备色谱

蛋白质的特定构象对蛋白质的生物功能起决定性的作用。而几乎所有的蛋白质必须与其他分子相结合才能发挥其功能和作用。当蛋白质的构象发生变化，例如通过加热或化学试剂处理等使多肽链的盘绕和折叠被解开，其空间结构发生变化， 则蛋白 ---性， 其功能和生物活性即丧失，作为现代生物科技的主要产品类型，蛋白质是结构和功能非常复杂的大分子。